Question

【題目】科學家嘗試使用Cre/loxP位點特異性重組系統，在檢測目的基因導入成功后，刪除轉基因煙草細胞內的抗除草劑基因。其技術過程如下（圖中的■代表基因前的啟動子)，據圖回答：

（1）loxP是一種只有34個堿基對構成的小型DNA片段，由兩個13個堿基對反向重復序列和中間間隔的8個堿基對序列共同組成，自身不會表達，插入質粒后也不影響原有基因的表達，其堿基序列如下：

Cre酶能特異性地識別此序列并在箭頭處切開loxP，其功能類似于基因工程中的_____________酶。

（2）將重組質粒導入植物細胞中最常用的方法是____________。作為標記基因，抗除草劑基因用于檢測目的基因是否導入成功的原理是___________________________。

（3）經檢測成功后，抗除草劑基因己沒有用途，繼續留在植物體內可能會造成的安全問題是_____________。經Cre酶處理后，質粒中的兩個loxP序列分別被切開后，可得到如上圖右側的這兩個DNA分子。由于____________的原因，抗除草劑基因不再表達，之后會在培養過程中消失。

（4）loxP序列是有方向性的。如果經Cre酶處理后，發現抗除草劑基因反向連接在質粒一上，則原來質粒一中這兩個loxP序列的方向是_________。

A.兩個都是正向 B.兩個都是反向

C.一個正向一個反向 D.與方向無關

Answer 1

【答案】（1）限制酶 基因重組 （2）抗除草劑基因和目的基因在同一個質粒上

（3）抗除草劑基因可能轉移到雜草中 抗除草劑基因前沒有了啟動子

（4）C

【解析】試題分析：（1）根據題意，Cre酶能特異性地識別此序列并在箭頭處切開loxP，其功能類似于基因工程中的限制酶。從遺傳學角度分析，Cre酶改變質粒后導致基因重組，屬于可遺傳變異。（2）由于抗除草劑基因和目的基因在同一個質粒上，因此作為標記基因，可用于檢測目的基因是否成功導入受體細胞。（3）抗除草劑基因留在植物體內可能轉移到雜草中造成基因污染。經Cre酶處理后，抗除草劑基因前沒有了啟動子的原因，抗除草劑基因在受體細胞內不再表達。（4）loxP序列是有方向性的。根據圖示Cre酶處理后的結果，可知原來質粒一中這兩個loxP序列一個正向一個反向，選C。