Question

【題目】圖表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，其等位基因d位于圖中虛線方框內的堿基對為T-A，現有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列有關敘述錯誤的是

A. MboⅠ、SmaⅠ切割位點不同，切割DNA片段后形成的末端也不同

B. 若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，則獲得的最長的DNA片段長度為790bp

C. 從雜合子中分離出圖1及其對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，得到3種不同長度的DNA片段

D. 構建基因表達載體的過程中，可以選擇限制酶BamHⅠ或MboⅠ對上述DNA片段進行切割

Answer 1

【答案】C

【解析】

分析題圖可知， MspⅠ的識別的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG，識別位點有兩個，且都在目的基因內部，形成的末端為黏性末端； BamHⅠ的識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC，識別位點也有兩個，在目的基因的兩端，形成黏性末端；MboⅠ的識別的堿基序列和酶切位點分別為↓GATC，識別位點也有兩個，在目的基因的兩端，形成粘性末端；SmaⅠ的識別的堿基序列和酶切位點分別為CCC↓GGG，識別位點有兩個，且都在目的基因內部，形成平末端。

由圖示和分析可知，MboⅠ、SmaⅠ切割位點不同，而且形成的末端也不同，故A正確；圖1中DNA片段含有兩個SmaⅠ識別位點，第一個識別位點在左端534 bp序列向右三個堿基對的位置；第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基的位置，從而兩個位點切割后產生的DNA片段的長度分別為534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段長度為537bp、790bp、661bp，故B正確；在雜合子體內含有基因D和基因d，基因D的序列中含有兩個識別位點，經過SmaI完全切割會產生537bp、790bp和661bp三種不同長度的片段，基因d的序列中含有一個識別位點，經過切割后會產生1327bp和661bp兩種長度的片段，綜上所述，雜合子中分離到該基因的DNA片段經過切割后會產生4種不同長度的片段，故C錯誤；由于限制酶BamHⅠ或MboⅠ對上述DNA片段進行切割，不會破壞目的基因的結構，所以構建基因表達載體的過程中，可以選擇限制酶BamHⅠ或MboⅠ，故D正確。

由于本題需選擇錯誤的，故答案為C。