Question

【題目】利用某高致病性病毒特異性的VP40抗原蛋白來制備單克隆抗體的流程圖如下，請回答：

（1）過程①利用質粒構建表達載體，質粒的來源主要是___________，質粒能夠在受體細胞中________，是其作為運載體的原因之一。

（2）過程②用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于___________。在培養基中加入四環素，能獲得含有目的基因的受體菌，原因是___________。可以利用___________檢測VP40基因是否進入大腸桿菌。

（3）用特定的選擇性培養基篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞的特點是___________；對雜交瘤細胞還需進行___________培養和抗體檢測，最終獲得單克隆抗體。

Answer 1

【答案】 細菌、酵母菌等 自我復制和穩定存在 感受態 質粒上有四環素抗性基因（或“受體菌獲得抗四環素的特性”） VP40基因探針 （或DNA分子雜交技術） 在體外培養條件下能無限增殖且能產生單一成分的抗體 克隆化

【解析】據圖分析，①表示構建基因表達載體的過程，②表示將目的基因導入受體細胞（大腸桿菌）的過程，③表示目的基因在受體細胞中的表達過程，④表示誘導B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程。

（1）質粒是基因工程中常用的運載體，主要來源于細菌、酵母菌等，其作為運載體的原因之一是能夠在受體細胞中自我復制和穩定存在。

（2）過程②表示將目的基因導入受體細胞（大腸桿菌）的過程，一般需要用鈣離子處理，使得大腸桿菌處于感受態，以便目的基因的導入。由于質粒上有四環素抗性基因，所以在培養基中加入四環素，能獲得含有目的基因的受體菌；檢測目的基因（VP40基因）是否進入大腸桿菌可以用DNA分子雜交技術（VP40基因探針）。

（3）雜交瘤細胞是由B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成的，具有兩個細胞的遺傳特性，因此其在體外培養條件下能無限增殖且能產生單一成分的抗體；對雜交瘤細胞還需進行克隆化培養和抗體檢測，最終獲得單克隆抗體。