Question

【題目】回答下列有關(guān)微生物和酶工程的問(wèn)題。

枯草芽孢桿菌盛產(chǎn)蛋白酶，后者在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，且已大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。

（1）在培養(yǎng)包括枯草芽孢桿菌在內(nèi)的異養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)包括水和_______________（用序號(hào)組合回答）。

①淀粉 ②蛋白質(zhì) ③生長(zhǎng)因子 ④葡萄糖 ⑤無(wú)機(jī)鹽

為篩選枯草芽孢桿菌的蛋白酶高產(chǎn)株，將分別浸過(guò)不同菌株(a~e)的分泌物提取液及無(wú)菌水（f） 的無(wú)菌圓紙片置于含某種高濃度蛋白質(zhì)的平板培養(yǎng)基表面；在37℃恒溫箱中放置2~3天，結(jié)果如圖17。

（2）大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化首選的菌株是_______________；菌株b提取物周?chē)鷽](méi)有形成明顯清晰區(qū)的原因是_______________。

圖18 顯示枯草芽孢桿菌的蛋白酶和其它酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其酶活性。在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在60~70℃保溫一定時(shí)間，再制備酶制劑。

（3）在60~70℃保溫一定時(shí)間的作用是__。

A.誘導(dǎo)蛋白酶的熱穩(wěn)定性 B.有利于發(fā)揮蛋白酶的最佳活性

C.裂解枯草芽孢桿菌細(xì)胞 D.大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性

（4）枯草芽孢桿菌蛋白酶制備的合理工藝步驟應(yīng)為_(kāi)____(選擇正確的序號(hào)并排序)。

①過(guò)濾 ②干燥 ③破碎 ④濃縮

Answer 1

【答案】（1）①②③⑤/②③④⑤

（2）a ①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足；②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足；③分泌的蛋白酶活性低

（3）D

（4）①④②

【解析】（1）培養(yǎng)異養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)包括水、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子和無(wú)機(jī)鹽。

（2）含某種高濃度蛋白質(zhì)的平板培養(yǎng)基上透明圈越大，說(shuō)明蛋白酶含量越高。菌株b提取物周?chē)鷽](méi)有形成明顯清晰區(qū)，可能是蛋白酶的合成、分泌或活性問(wèn)題。

（3）據(jù)圖18可知，60~70℃時(shí)其他酶活性很低，在60~70℃保溫一定時(shí)間，可以大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性。

（4）枯草芽孢桿菌蛋白酶可以分泌到細(xì)胞外，因此不需破碎過(guò)程，經(jīng)過(guò)濾、濃縮、干燥程序即可。