Question

【題目】隨著社會的發展，石油產品的使用越來越多，石油烴污染也越來越嚴重。為了篩選出分解石油烴能力強的微生物，人們不斷地進行研究。下圖為獲取能分離出分解石油烴的微生物的土壤樣品后的研究過程，請回答有關問題：

(1)獲取土壤樣品的取樣地點最好選在_________。為了能有效地分離出分解石油烴的微生物,過程①④所用的選擇培養基只能以石油烴作為唯一碳源，其原因是_____________。

(2)根據⑤平板上生長的菌落，對④進行接種采用的方法是______________,若發現在⑤中無法區分菌落，可以將圖中③取出的菌液_____________。

(3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是_________。采用________方法對其進行滅菌。劃線的某個平板培養后,第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落,第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是_______________(寫出一點即可)。

Answer 1

【答案】 石油烴污染明顯處 只有能利用石油烴的微生物能正常生長繁殖 涂布分離 進行（梯度）稀釋 接種環 灼燒 接種環灼燒后未冷卻；劃線未從第一區域末端開始劃線

【解析】試題分析：微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）要獲取相應的菌種，應到相應的環境中獲取，獲取土壤樣品的取樣地點最好選在石油污染明顯處；有些培養基可以抑制其他微生物的生長，這樣的培養基可稱做選擇培養基；因此，為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過程①一④所用培養基，其成分的特點是只含石油烴一種碳源，從而有利于目的菌的生長，抑制其他微生物的生長。

（2）④中的培養基從物理特征看屬于固體培養基，可加入凝固劑瓊脂處理，常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；根據⑤平板上生長的菌落，對④進行接種采用的方法是涂布分離；若⑤中發現無法區分菌落，說明稀釋度不夠，可以將重新進行梯度稀釋。

（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環，采用灼燒方法對其進行滅菌。劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落；造成劃線無菌落可能的操作失誤是接種環灼燒后未冷卻；劃線未從第一區域末端開始劃線。