Question

【題目】如圖是利用轉基因技術培育抗病小麥的過程。請據(jù)圖回答問題：

(1)重組質粒T除含有目的基因外，還必須有________、________和________等。

(2)圖示中將基因表達載體構建完成后沒有直接導入農(nóng)桿菌，而是先將其導入大腸桿菌，目的是____________________________。

(3)在步驟⑤⑥中都需用________處理。為了確認目的基因通過⑦導入植物細胞后是否轉錄，通常采用______________法進行檢測；驗證目的基因導入受體細胞后是否成功表達，通常采用______________法從分子水平進行檢測。

(4)假設該抗病基因D，通過基因工程導入小麥后連接到小麥的一條染色體上，則該小麥進行減數(shù)分裂的細胞在聯(lián)會時有________個D基因。

Answer 1

【答案】啟動子 終止子 標記基因 獲取大量重組質粒(讓目的基因擴增) Ca2＋ 分子雜交 抗原—抗體雜交 2

【解析】

1、基因表達載體的構建是基因工程的核心，目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用．基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因。

2、農(nóng)桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。

（1）將目的基因和質粒重組成重組質粒的過程是基因表達載體的構建，基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因。故重組質粒T除含有目的基因外，還必須有啟動子、終止子、標記基因。

（2）圖示中將基因表達載體構建完成后沒有直接導入農(nóng)桿菌，而是先將其導入大腸桿菌，目的是獲取大量重組質粒(讓目的基因擴增)。

（3）在步驟⑤⑥都需要將重組質粒導入細胞內(nèi)，故都需用Ca2＋處理，使細胞處于感受態(tài)。檢測目的基因在植物細胞內(nèi)是否轉錄，根據(jù)轉錄的產(chǎn)物RNA與DNA中的模板鏈成堿基互補配對的原則，采用分子雜交法進行檢測；驗證目的基因導入受體細胞后是否成功表達，通常采用抗原—抗體雜交法從分子水平進行檢測。

（4）假設該抗病基因D，通過基因工程導入小麥后連接到小麥的一條染色體上，經(jīng)過減數(shù)分裂第一次間期DNA復制，每條染色體上含有兩個染色單體，故在減數(shù)第一次分裂前期同源染色體聯(lián)會時有2個D基因。