Question

【題目】促紅細胞生成素(EPO)是體內促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細胞生成素主要來自于基因工程技術生產的重組人促紅細胞生成素(rhEPO），生產流程如圖，請回答下列問題：

（1）圖中①所指的技術中，需要在進行過程中補充的物質是_______。圖中②所指的物質是____，檢測細胞能否表達出③的方法是_______技術。

（2）受體細胞選擇倉鼠卵巢細胞系，主要是基于這種細胞的________特性。培養重組CHO 細胞時，除適宜的溫度及無菌條件外，還需要保證的環境因素是________________，為防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害，應____。

（3）科學家經過努力現已研制出了可以口服的EPO，為培育出乳汁中含有此類EPO的轉基因牛，需選擇__________作為受體細胞，在操作中可能涉及的胚胎工程技術主要有______________（要求填兩項）。

Answer 1

【答案】 原料和引物 mRNA 抗原——抗體雜交 可無限增殖 氣體條件（5%CO2濃度） 定時更換培養液（定期換瓶） 受精卵 體外受精、體外胚胎培養、胚胎移植、胚胎分割

【解析】試題分析：據圖分析可知：①和②過程都是獲取目的基因的途徑，①是利用PCR技術短時間內擴增目的基因，②是通過反轉錄法獲取目的基因，獲得此圖是利用基因工程技術生產的重組人工紅細胞生成素（rhEPO）期間要生產流程，最終產物是紅細胞生成素（rhEPO），由此可推測出圖中高效表達出③的重組CHO細胞是高效表達出紅細胞生成素（rhEPO）的重組細胞。

（1）由圖可知：①過程是PCR擴增目的基因技術，在生物體外復制，需要在復制過程中補充的脫氧核苷酸原料和2種引物。圖中②為逆轉錄過程，模板是mRNA，③為紅細胞生成素，屬于蛋白質，因此可以用抗原——抗體雜交技術來檢測。

（2）倉鼠卵巢細胞系能無限增殖，因此選擇該細胞作為受體細胞，動物細胞要在95%空氣加5%CO2的混合氣體中培養，CO2主要作用是維持培養液的pH。細胞在培養液中培養過程中，營養物質逐漸被消耗，逐漸產生代謝廢物和PH降低等等因素都會使細胞受到傷害，因此需要定期更換培養液。

（3）培養EPO的轉基因牛，需選擇受精卵作為受體細胞，因為受精卵全能性比較高。轉基因牛的產生是有性生殖的一種，要經過體外受精、胚胎的早期培養、胚胎移植和胚胎分割等技術。