Question

【題目】下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。

（1）基因工程中使用的限制酶，其特點(diǎn)是_________。

（2）將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X-1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類型有 。（多選）

①X-1 ②X-2 ③X-3 ④X-4

（3）若將上圖所示X—1、X—2、X—3、X—4四種質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環(huán)素的兩種培養(yǎng)基上。在這兩種培養(yǎng)基上均不能生長(zhǎng)的大腸桿菌細(xì)胞類型有 。

（4）如果X-1用E1酶切，產(chǎn)生850對(duì)堿基和3550對(duì)堿基兩種片段：那么質(zhì)粒X-2（Tcr基因的長(zhǎng)度為1200對(duì)堿基）用E2酶切后的片段長(zhǎng)度為 對(duì)堿基。

Answer 1

【答案】（1）特異性地識(shí)別和切割DNA

（2）①②③

（3）無質(zhì)粒細(xì)胞和含X-3的細(xì)胞

（4）4750

【解析】

試題分析：（1）基因工程中使用的限制酶，其特點(diǎn)是特異性地識(shí)別和切割DNA。

（2）用限制酶E1切開質(zhì)粒X-1后，質(zhì)粒X-1暴露出兩個(gè)粘性末端，APr被切下．兩端用E1切開的Tcr基因含有與上述切割后的質(zhì)粒X-1，Apr含有相同的粘性末端，混合后可形成X-1、X-2和X-3。

（3）含質(zhì)粒X-1的細(xì)胞可在含青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，含質(zhì)粒X-2的細(xì)胞可在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；含質(zhì)粒X-3的細(xì)胞不含抗性基因，不能在兩種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；不含有質(zhì)粒的細(xì)胞也不能在兩種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

（4）X-2的長(zhǎng)度為1200+3550=4750，用E2酶切后質(zhì)粒由環(huán)狀變?yōu)殒湢?/span>。