Question

【題目】【生物一選修3:現(xiàn)代生物科技專題】某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。

（1）抗鹽某因是否在煙草細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵是________________。

（2）在構建重組質(zhì)粒時，應選用__________和__________兩種酶對目的基因和質(zhì)粒進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

（3）將目的基因?qū)�入植物細胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。含有目的基因的農(nóng)桿菌可根據(jù)標記基因進行篩選。若農(nóng)桿菌在含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上都可以生長繁殖，農(nóng)桿菌中是否己含有目的基因？

__________(是/否)。為什么？_________________________________________________。

（4）愈傷組織經(jīng)__________形成完整植株，這一過程需要再轉(zhuǎn)接到___________培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，該過程的實質(zhì)是__________________。

Answer 1

【答案】 抗鹽基因（目的基因）是否插入到煙草的染色體DNA上 HindⅢ SalⅠ 否 含有目的基因的質(zhì)粒抗四環(huán)素的基因被破壞 再分化 分化 基因的選擇性表達

【解析】試題分析：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能根據(jù)圖中限制酶的位置及題干要求選擇正確的限制酶；掌握目的基因檢測和鑒定的方法等。

（1）抗鹽某因是否在煙草細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵是抗鹽基因（目的基因）是否插入到煙草的染色體DNA上。

（2）只有SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA與質(zhì)粒，形成相同的黏性末端，容易發(fā)生自身連接和反向接入；HindⅢ會破壞目的基因；則在構建重組質(zhì)粒時，應選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

（3）選用SalI、HindIII兩種酶對質(zhì)粒進行切割時，形成的重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉基因而抗四環(huán)素基因被破壞，故農(nóng)桿菌中沒有含有目的基因，為篩選出導入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，應在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素。

（4）愈傷組織經(jīng)再分化，形成完整植株，這一過程需要再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，細胞分化的實質(zhì)是選擇性表達。