Question

【題目】Bt基因即是蘇云金芽胞桿菌（Badcillus thuringiensis，簡稱Bt）基因，因其表達產物Bt毒蛋白殺蟲效果好、安全、高效等優點而成為應用最為廣泛的轉殺蟲基因．如圖為培育轉Bt基因苗的基本操作過程．
（1）Bt基因可從構建的Bt基因組文庫中獲取，也可以從其cDNA文庫中獲取，從前者獲取的基因（填“含有”或“不含有”）啟動子．若利用PCR技術從cDNA文庫中獲取Bt基因（基因序列未知），需根據Bt蛋白氨基酸序列設計引物，引物的序列可以有多種，原因是 ． 在PCR體系中需加入其中的（填“全部”或“任意1種”或“其中2種”）引物，若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為種．
（2）在構建基因表達載體的過程中，為了方便篩選含有目的基因的細胞，作為運載體的Ti質粒應含有基因，其中是驅動基因轉錄的酶識別和結合的位點，而能幫助目的基因整合到宿主細胞染色體上的序列稱為 ． 圖示將目的基因導入受體細胞的方法是 ．
（3）步驟Ⅳ中產生的細胞團稱為 ， 步驟Ⅳ和Ⅴ過程要注意控制培養基中的濃度比例，以便獲得幼苗．

Answer 1

【答案】
（1）含有；一種氨基酸可能有多種密碼子，對應生物DNA堿基序列就會有多種；全部；2
（2）標記基因（抗性基因）；啟動子；T﹣DNA（可轉移DNA）；農桿菌轉化法
（3）愈傷組織；生長素與細胞分裂素
【解析】解：（1）Bt毒蛋白基因屬于目的基因，目的基因可從基因組文庫中獲取，也可從cDNA文庫中獲取，含有基因中啟動子的文庫是基因組文庫．若利用PCR技術從cDNA文庫中獲取Bt基因，需根據Bt蛋白氨基酸序列設計引物，引物的序列可以有多種，原因是一種氨基酸可能有多種密碼子，對應生物DNA堿基序列就會有多種．在PCR體系中需加入其中的全部引物，若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為2種．（2）標記基因是作用是鑒別和篩選含有目的基因的受體細胞；啟動子的作用是RNA聚合酶識別和結合的位點，驅動轉錄；T﹣DNA的作用是幫助目的基因整合到宿主細胞染色體上；將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法．（3）步驟Ⅳ中產生的細胞團稱為愈傷組織，步驟Ⅳ和Ⅴ過程要注意控制培養基中生長素與細胞分裂素的濃度比例，以便獲得幼苗． 所以答案是：（1）含有；一種氨基酸可能有多種密碼子，對應生物DNA堿基序列就會有多種；全部；2；（2）標記基因（抗性基因）；啟動子；T﹣DNA（可轉移DNA）；農桿菌轉化法；（3）愈傷組織；生長素與細胞分裂素
【考點精析】解答此題的關鍵在于理解基因工程的原理及技術的相關知識，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術．