Question

根據各類微生物的形態結構特點和新陳代謝類型，利用選擇性培養基和鑒別培養基，結合顯微鏡檢以及菌落特征，可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開來。下面是分離篩選的方法步驟，請根據各個步驟的條件，填寫空格中的內容。
首先配制一系列不同性質的固體培養基，然后進行滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養基上進行培養。
⑴用無氮培養基可以篩選出　　　　　　　　　　　　　　　。
⑵用不含有機碳源的選擇培養基可以篩選出　　　　　　　　　　　。
⑶酵母菌的篩選需要在常規培養基另加入　　　　　　　　　　　　　。
⑷用加入了較高濃度的NaCl的選擇培養基可以篩選出　　　　　　　　　　，或者根據菌落的顏色呈現　　　　　色，將其挑取單獨培養。
⑸利用伊紅－美藍培養基培養混合菌，菌落呈　　　　色，并帶有金屬光澤的是　　　　，挑取單個菌落培養。結合顯微鏡檢和進一步用伊紅－美藍培養基鑒別來確定。
⑹在無氧條件下培養混合菌，　　　　　　　　　　可以生長，加入一定濃度的乳酸，使培養基pH充分降低，可抑制　　　　　　菌的生長，利用菌落特征，結合顯微鏡檢，選取生長優勢的菌落，即可分離出　　　　　　。

Answer 1

⑴圓褐固氮菌　　　⑵硝化細菌　　⑶青霉素　　　⑷金黃色葡萄球菌　　金黃　⑸深紫　大腸桿菌　　⑹乳酸菌和酵母菌　酵母　乳酸菌

解析試題分析：本題考查利用選擇培養基分離篩選微生物。
⑴用無氮培養基可以篩選出圓褐固氮菌，因為圓褐固氮菌可以自生固氮，不需要氮源。
⑵用不含有機碳源的選擇培養基可以篩選出硝化細菌，因為硝化細菌是化能自養型生物，不需要碳源。
⑶酵母菌的篩選需要在常規培養基另加入青霉素，因為青霉素僅對細菌起作用，對酵母補齊作用。其實最好是氨芐青霉素，大腸桿菌等革蘭氏陰性菌對青霉素不敏感。
⑷用加入了較高濃度的NaCl的選擇培養基可以篩選出金黃色葡萄球菌，或者根據菌落的顏色呈現金黃色，將其挑取單獨培養，因為金黃色葡萄球菌耐高鹽。
⑸利用伊紅－美藍培養基培養混合菌，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤的是大腸桿菌，挑取單個菌落培養。結合顯微鏡檢和進一步用伊紅－美藍培養基鑒別來確定。
因為伊紅為酸性染料，美藍為堿性染料。當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍結合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。
⑹在無氧條件下培養混合菌，乳酸菌和酵母菌可以生長，加入一定濃度的乳酸，使培養基pH充分降低，可抑制酵母菌的生長，利用菌落特征，結合顯微鏡檢，選取生長優勢的菌落，即可分離出乳酸菌。因為大腸桿菌很耐酸的。
考點：選擇性培養基篩選大腸桿菌、硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌。
點評：本題綜合性強，突出理解、分析和推理能力的培養。