Question

【題目】將餐廚垃圾無害化處理，是環境保護的一項重要措施。某研究團隊擬從餐廚垃圾中分離出具有高效降解能力的微生物，并制成菌制劑，用于餐廚垃圾無害化處理。所進行實驗的簡要步驟如下：

步驟一：取一定量的餐廚垃圾樣品，篩除大塊雜質后，裝入無菌袋中密封，備用。

步驟二：配制用于培養菌種的培養基，配方如下表所示。

成分	蛋白氯	牛肉膏	氯化鈉	瓊脂
含量（g/L）	10	15	10	5

步驟三：制備樣品稀釋液，并將不同濃度的樣品稀釋液涂布于平板培養基表面進行培養，48h后觀察結果。

步驟四：對20種菌種進行分離純化。

（1）牛肉膏、蛋白胨中含有磷酸鹽、糖、維生素和_______等營養成分，寫出制備牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基的簡要流程（用“→”連接）： ___________________________________。使用后的培養基一定要進行_______（填“滅菌”或“消毒”）處理。

（2）微生物在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基中可形成菌落，菌落對微生物研究工作有很大作用，可用于_______________________（答出兩項即可）等工作。利用稀釋涂布平板法進行接種時，要對菌液進行充分稀釋的目的是____________________________。

（3）為了比較這些菌種對餐廚垃圾中淀粉的降解效果，配制含淀粉的培養基，分別用于測定各菌種對淀粉的降解效果，并進行測定。下圖表示其中4種菌種（X1-X4）在淀粉培養基上的培養結果，寫出圖示的測定菌種對淀粉降解效果的實驗原理：____________________。

Answer 1

【答案】有機氮 計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板 滅菌 分離菌種 、鑒定菌種、細菌計數、選種育種 使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，能在培養基中形成單個的菌落 菌種對淀粉降解的能力越強，分解培養基中的淀粉就越多，培養基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大

【解析】

1.微生物實驗室分離中配制培養基的操作步驟：計算→稱量→溶解→調pH→滅菌→倒平板等步驟。

2.設計實驗應遵循的原則有單一變量原則、對照原則、等量原則、科學性原則和可重復性原則。

（1）制備牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基的簡要流程為：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板，其中牛肉膏、蛋白胨中含有磷酸鹽、糖、維生素和有機氮等營養成分，使用后的培養基一定要進行滅菌處理，以防止對環境造成污染。

（2）微生物在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基中可形成菌落，利用菌落，可完成分離菌種 、鑒定菌種、細菌計數、選種育種等工作。為了獲得單個細胞形成的菌落，在利用稀釋涂布平板法進行接種時，需要通過充分稀釋將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，通過涂布接種后就能在培養基中形成單個的菌落。

（3）實驗目的是比較這些菌種對餐廚垃圾中淀粉的降解效果，根據實驗目的可知，實驗的自變量是菌種的不同，因變量是降解效果的不同，測量指標為透明圈的大小，這里比較的是透明圈的直徑與菌落直徑的比值，比值越大說明該菌落的菌種分解淀粉的能力越強，測定D/D0值的原理是：菌種對淀粉降解的能力越強，分解培養基中的淀粉就越多，培養基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大。