Question

【題目】據《青島新聞網》報道，2016年10月14日，袁隆平院士領銜的青島海水稻研究發展中心在李滄區簽約落戶，袁隆平院士表示，將在3年之內研發出畝產300公斤的海水稻。轉基因技術是培育耐鹽海水稻的一種思路。回答下列相關問題：

（1）獲取抗鹽基因的方法有_______________和人工合成等，為了獲取足夠多的抗鹽基因，可利用_______技術來擴增抗鹽基因，該技術用到的酶是______________________。

（2）外源DNA和質粒上的限制酶的識別位點如圖所示，構建基因表達載體時，所用的限制酶最好是______，理由是_______________________。

（3）水稻為單子葉植株，____________法是該類植物中常用的一種基因轉化方法，但是成本較高。

（4）抗鹽基因的檢測與鑒定是基因工程的最后一步。檢測目的基因時，所用的探針實際上是_____________。

（5）將含抗鹽基因的水稻細胞培育成完整植株的技術為_______________。

Answer 1

【答案】 從基因文庫中獲取 PCR(或多聚酶鏈式反應） 熱穩定DNA聚合酶（或Taq酶） BamHⅠ和HindⅢ 能提高抗鹽基因與質粒之間的重組率 基因槍 被（放射性同位素）標記的含抗鹽基因的單鏈DNA分子 植物組織培養

【解析】試題分析：據圖分析，含有目的基因（抗鹽基因）的外源DNA分子和質粒中都含有限制酶BamHⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的識別序列和切割位點，其中BamHⅠ的酶切位點在目的基因和質粒的中間和質粒的標記基因上，EcoRⅠ在目的基因的兩側都有，可能會導致基因反向連接，因此構建基因表達載體時最好使用BamHⅠ和HindⅢ。

（1）抗鹽基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲取。實驗室常用PCR技術擴增目的基因，該過程需要耐高溫DNA聚合酶的催化。

（2）根據以上分析可知，構建基因表達載體時，利用BamHⅠ和HindⅢ可以提高抗鹽基因與質粒之間的重組率。

（3）將重組質粒導入單子葉植物常用的方法是基因槍法。

（4）檢測目的基因用的探針的本質是被（放射性同位素）標記的含抗鹽基因的單鏈DNA分子。

（5）將含抗鹽基因的水稻細胞培育成完整植株，還需要利用植物組織培養技術。