Question

【題目】抗菌肽是一類由昆蟲產生的多肽，同時具備抗霉菌、廣譜殺菌、抑制病毒、抑殺腫瘤細胞等多重功能。目前已獲得具有轉抗菌肽基因的轉基因動、植物，均具有較高抗病性。

（1）構建基因表達載體的過程中使用的兩種工具酶是_______。質粒作為常用的運載體，應具備的基本條件有_____________（寫出兩點即可） 。若重組質粒如圖甲所示，抗菌肽能否正常表達______ ，原因是_________。

（2）選用抗菌肽PR39基因培育轉基因小鼠時，應將重組質粒導入______細胞；通過________，可直接證明轉基因小鼠對細菌的抵抗力。

（3）選用抗菌肽PR39基因培育轉基因植物時，應將重組質粒導入其______細胞，再通過______技術快速繁殖轉基因植物。此過程中，通過調節_______ 激素的配比誘導其脫分化與再分化過程。

Answer 1

【答案】 限制性核酸內切酶（限制性酶）、DNA連接酶 能夠自我復制、具有標記基因、具有一個至多個限制酶切割位點、需具有啟動子和終止子等 否 圖中目的基因插入在啟動子的上游，無法開始轉錄 受精卵 人工細菌感染，比較轉 PR39 基因小鼠與野生型小鼠之間的抗菌能力的差異 （正常）體 植物組織培養 生長素與細胞分裂素

【解析】試題分析：據圖分析，圖示為基因表達載體，其含有的成分有目的基因、啟動子、終止子和復制原點；目的基因插入的位置不在啟動子與終止子之間，因此該目的基因不能表達；該基因表達載體沒有標記基因，不能檢測目的基因是否導入受體細胞。

（1）基因工程中，常用的工具酶是限制酶和DNA連接酶；質粒作為運載體，必須具備的條件是：能夠自我復制、具有標記基因、具有一個至多個限制酶切割位點、需具有啟動子和終止子等。根據以上分析已知，該基因表達載體上的目的基因不能正常表達，因為圖中目的基因插入在啟動子的上游，無法開始轉錄。

（2）選用抗菌肽PR39基因培育轉基因小鼠時，一般將重組質粒導入受精卵；通過人工細菌感染，比較轉 PR39 基因小鼠與野生型小鼠之間的抗菌能力的差異，可直接證明轉基因小鼠對細菌的抵抗力。

（3）選用抗菌肽PR39基因培育轉基因植物時，一般將重組質粒導入其體細胞，再通過植物組織培養技術快速繁殖轉基因植物。此過程中，通過調節生長素與細胞分裂素激素的配比誘導其脫分化與再分化過程。