Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題

（一）研究小組從土壤中篩選以多環芳烴（PAHs）為碳源和能源的細菌，用以降解工業廢水和生活污水中的PAHs。請回答：

（1）為了從土壤中篩選PAHs降解菌，需配制以____________為唯一碳源的培養基，培養基經________[A. 121℃（500g/cm2 壓力），15min B. 90℃（500g/cm2壓力），15min C. 121℃（lkg/cm2壓力），15minD. 90℃（500g/cm2壓力），30min]髙壓蒸汽滅菌，待冷卻至60℃后倒平板。

（2）倒平板時應使錐形瓶的瓶口通過火焰，目的是____________。在倒平板的過程中，如果培養基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則這個平板不能用來培養PAHs降解菌，原因是________________________。

（3）制備土壤稀釋液，用____________方法接種于固體培養基表面，培養時，需將培養皿____________并放在37℃恒溫培養箱中培養24h。

（4）用劃線法純化PAHs降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是____________________________________。

（二）下圖為某大學農學部奶牛繁育基地成功培育出的一頭攜帶轉入賴氨酸基因的克隆牛的大致過程，請據圖回答問題：

（1）圖中獲得賴氨酸基因常用的酶是____________________，若我們己知賴氨酸基因的堿基序列，一般釆用____________法獲取該目的基因。

（2）黑白花奶牛乳腺組織常用____________分散成單細胞，然后作為核供體。將得到的體細胞的細胞核移植到去核的未受精的卵細胞中才能發育成新個體，其原因是____________（A.卵細胞大，便于操作B.卵細胞含有的營養物質多 C.卵細胞的細胞質可使體細胞核全能性得到表達 D.重組細胞才具有全能性）。

（3）從④到⑤的過程可獲得較多的遺傳同質早期胚胎，常采用的方法是進行____________。

（4）克隆牛的誕生過程中涉及到的現代生物技術主要有：____________、____________。

Answer 1

【答案】 PAHs C 防止雜菌污染 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生 涂布 倒置 使細菌數隨著劃線次數的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落 限制性核酸內切酶 化學合成 胰蛋白酶 C 胚胎分割 核移植技術 胚胎分割

【解析】試題分析：熟記并理解微生物的實驗室培養等相關基礎知識，形成清晰的知識網絡；在此基礎上，從題意中提取信息并對（一）題進行作答。以圖示中的文字信息和箭頭指向為切入點，圍繞目的基因的獲取、動物細胞培養、核移植技術、胚胎分割技術等相關知識，結合問題情境，對（二）題進行解答。

（一）(1) 從土壤中篩選PAHs降解菌，需配制以PAHs為唯一碳源的培養基，培養基經C選項所示的121℃（lkg/cm2壓力）、15min的髙壓蒸汽滅菌，待冷卻至60℃后倒平板。

(2) 倒平板時，為了防止雜菌污染，應使錐形瓶的瓶口通過火焰。在倒平板的過程中，如果培養基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則可能導致空氣中的微生物在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生，因此這個平板不能用來培養PAHs降解菌。

(3) 制備土壤稀釋液，用涂布方法接種于固體培養基表面。培養時，為了防止培養皿被污染，需將培養皿倒置并放在37℃恒溫培養箱中培養24h。

(4) 用劃線法純化PAHs降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是：使細菌數隨著劃線次數的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而成的菌落。

（二）(1)圖中的賴氨酸基因為目的基因，獲得目的基因常用限制性核酸內切酶。若我們己知賴氨酸基因的堿基序列，一般釆用化學合成法獲取該目的基因。

(2)常用胰蛋白酶處理黑白花奶牛乳腺組織，使其分散成單細胞，然后作為核供體。由于C選項所示的卵細胞的細胞質可使體細胞核全能性得到表達，所以需將得到的體細胞的細胞核移植到去核的未受精的卵細胞中才能發育成新個體。

(3)從④到⑤的過程，常采用胚胎分割技術，以獲得較多的遺傳同質早期胚胎。

(4)分析圖示可知，克隆牛的誕生過程中涉及到的現代生物技術主要有：核移植技術、胚胎分割技術。