Question

【題目】科研人員利用胚胎干細胞對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療， 其技術流程如圖。 請回答：

⑴ 過程①獲得重組胚胎之前需要通過______技術獲得重組細胞， 接受細胞核的卵母細胞應處于時期， 并用微型吸管吸出______。

⑵ 步驟②中， 重組胚胎培養到囊胚期時， 可從其______分離出 ES 細胞， ES 細胞在形態上表現為細胞核______ 、明顯， 在功能上具有______。

⑶ 步驟③中， 需要構建含干擾素基因的______， 構建之前可以利用______技術對目的基因進行擴增。

⑷ 步驟③中將基因導入 ES 細胞的方法通常是______法， 為了檢測 ES 細胞的 DNA 上是否插入了干擾素基因， 可采用______技術。 在正常的小鼠體內， 干擾素是在______(填一種細胞器)上合成的。

Answer 1

【答案】 核移植 MⅡ 細胞核 內細胞團 大 核仁 發育的全能性 （基因）表達載體 PCR 顯微注射 DNA分子雜交 核糖體

【解析】本題結合圖形考查胚胎工程和基因工程，要求考生理解相關知識的要點，把握知識間內在聯系，形成知識網絡結構的能力；能利用所學知識解讀圖形，判斷出圖中①是細胞核移植、②是早期胚胎培養、③是目的基因導入受體細胞的過程，可據此分析答題。

⑴ 分析圖形可知，圖中過程①是體細胞核移植，在獲得重組胚胎之前需要通過核移植技術獲得重組細胞，接受細胞核的卵母細胞應處于MⅡ時期，并用微型吸管吸出細胞核。

⑵ 步驟②是早期胚胎培養， 重組胚胎培養到囊胚期時， 可從其內細胞團分離出ES細胞；ES細胞在形態上表現為細胞核大、核仁明顯， 在功能上具有發育的全能性。

⑶ 步驟③是目的基因導入受體細胞的過程， 需要構建含干擾素基因的（基因）表達載體， 構建之前可以利用PCR技術對目的基因進行擴增。

⑷ 步驟③中將基因導入 ES 細胞的方法通常是顯微注射法，為了檢測ES細胞的DNA上是否插入了干擾素基因， 可采用DNA分子雜交技術，若檢測出雜交帶，則說明ES細胞的DNA上是否插入了干擾素基因。干擾素的成分是一種含少量糖類的蛋白質，在正常的小鼠體內，干擾素是在核糖體上合成的。