Question

【題目】下圖為將某動物的抗凍蛋白基因導入煙草細胞后培育抗凍煙草的過程示意圖。請據圖回答下列問題：

(1)對獲得的抗凍蛋白基因可通過___________快速擴增其數量，該過程中需要的酶是___________，①過程中需用到的工具酶包括___________。

(2)②過程常采用___________法將抗凍蛋白基因導入煙草細胞，為檢測抗凍蛋白基因是否整合到煙草細胞染色體的DNA上，可利用___________制成的探針通過DNA分子雜交進行檢測。

(3)③過程中轉基因煙草細胞經誘導形成愈傷組織的過程稱為___________，然后再發育成完整的幼苗。④過程運用的主要生物技術所依據的生物學原理是___________。

Answer 1

【答案】PCR技術（聚合酶鏈式反應） 耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶） 限制性核酸內切酶和DNA連接酶 農桿菌轉化 放射性同位素標記的抗凍蛋白基因的DNA片段 脫分化 植物細胞的全能性

【解析】

據圖分析，①表示形成重組質粒，②表示導入受體細胞，③表示脫分化，④表示再分化；構建重組質粒時需要用到核酸內切酶和DNA連接酶，結合魚的抗凍蛋白基因可知，構建重組質粒時需選用的核酸內切酶是SmaⅠ、PstⅠ，質粒上的ampr為標記基因。

（1）擴增獲得的抗凍蛋白基因可通過PCR技術實現，該過程中需要用到Taq酶，①過程中需用到的工具酶包括限制性核酸內切酶和DNA連接酶。

（2）將重組質粒導入到植物細胞中常用農桿菌轉化法，故②過程可采用農桿菌轉化法將抗凍蛋白基因導入煙草細胞，為檢測抗凍蛋白基因是否整合到煙草細胞染色體的DNA上，可利用放射性同位素標記的抗凍蛋白基因的DNA片段制成的探針通過DNA分子雜交進行檢測。

（3）③過程中轉基因煙草細胞經誘導形成愈傷組織的過程稱為脫分化，然后再發育成完整的幼苗，④過程運用的主要生物技術所依據的生物學原理是植物細胞的全能性。