Question

【題目】某生物興趣小組在“蛋白質的提取和分離”實驗中，準備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設計的“血紅蛋白提取、分離流程圖”如下：

請回答下列有關問題：

（1）樣品處理中紅細胞的洗滌要用________反復沖洗、離心。向紅細胞懸液中加入一定量的低濃度pH＝7．0的緩沖液并充分攪拌，可以破碎紅細胞，破碎細胞的原理是________。

（2）血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是____________，若要盡快達到理想的透析效果，可以________________________（寫出一種方法）。

（3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的______________________________等的差異，而產生不同遷移速度，實現各種分子的分離。

（4）一同學通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳，觀察到正常人和鐮刀型細胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結果如圖所示。由圖可知攜帶者有_____種血紅蛋白，從分子遺傳學的角度作出的解釋是__________________________。

Answer 1

【答案】生理鹽水 滲透原理（當外界溶液濃度低于動物細胞內液濃度時，細胞吸水漲破） 除去小分子雜質 增加緩沖液的量或及時更換緩沖液 帶電性質以及分子大小、形狀 2 攜帶者具有（控制血紅蛋白的）一對等位基因，可以控制合成兩種不同的蛋白質

【解析】

1、血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。（3）純化：調節緩沖液面→加入蛋白質樣品→調節緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質。（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。
2、電泳法是利用待測樣品中各種分子帶電性質的差異和分子本身的大小、形狀不同，使帶電分子產生不同的遷移速度，從而實現樣品中各種分子的分離或鑒定。

（1）樣洗滌紅細胞可以用生理鹽水。向紅細胞懸液中加入一定量的低濃度pH=7.0的緩沖液并充分攪拌，可以破碎紅細胞，其原理是滲透原理（當外界溶液濃度低于動物細胞內液濃度時，細胞吸水漲破）。
（2）透析的目的是除去小分子雜質；若要盡快達到理想的透析效果，可以增加緩沖液的量或及時更換緩沖液。
（3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的帶電性質以及分子大小、形狀等的差異，而產生不同遷移速度，實現各種分子的分離。
（4）由圖可知攜帶者有2種血紅蛋白，原因是攜帶者具有（控制血紅蛋白的）一對等位基因，可以控制合成兩種不同的蛋白質。