Question

【題目】【生物——選修1：生物技術實踐】欲從土壤中篩選出能產生脲酶的微生物并予以純化計數，采用了下圖所示的基本操作流程，請回答下列問題：

（1）取得土樣后應先用 （填試劑）對土壤進行梯度稀釋，然后將稀釋涂布在平面培養基上，這種選擇培養基在營養組成上的重要特點是 。在這樣的培養基上長出的細菌 （填“一定”或“不一定”）都能產生脲酶。若在平板中加入酚紅，目的菌落出現的變化是 。

（2）若要對相應微生物進行計數，一個稀釋度應涂布2到3個平板，并計算 。若稀釋不夠高，所得的數據與實際值比較應 （填“偏大”“偏小”或“相等”）。經涂布獲得的菌落可以采用平板劃線法進一步純化，每次劃線后接種環必須 ，才能再次用于劃線。獲得的純化菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或蓋上封口膜，不能密封，原因是 。

Answer 1

【答案】（15分，每空2分，特殊說明除外）

（1）無菌水 氮源只有尿素 不一定（1分） 菌落周圍出現紅圈

（2）平均值 偏小 灼燒 細菌有氧呼吸需要氣體流通

【解析】（1）對土壤進行梯度稀釋應用無菌水，由題意可知要篩選能產生脲酶的微生物，所以該培養基應以尿素為唯一氮源的培養基上。在這樣的培養基上長出的細菌不一定都能產生脲酶，因為有些固氮的微生物也能生存。如果加入酚紅能出現紅色的菌落就是目的菌落。

（2）計數應取平均值。如果稀釋度不夠高，所得數據應比實際數值偏小，因為菌落都是在一起的。平板劃線法每次劃線后接種環必須進行灼燒滅菌才能再次劃線。保存菌種不能密封原因是細菌進行有氧呼吸需要氣體流通，否則會無法生存。

土壤中分解尿素的細菌	分解纖維素的微生物
①選擇培養基的成分：尿素作為唯一的氮源 ②鑒定方法：在培養基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說明細菌能分解尿素	①選擇培養基的成分：纖維素作為唯一的碳源 ②鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，培養基出現以纖維素分解菌為中心的透明圈