Question

番茄不易儲(chǔ)存與多聚乳糖醛酸酶（PG）有關(guān)，科學(xué)家將人工合成的反義多聚乳糖醛酸酶基因?qū)�入番茄，獲得轉(zhuǎn)基因延熟番茄，是番茄的存儲(chǔ)時(shí)間大大延長(zhǎng)。已知質(zhì)粒上有Pst I、Sma I 、Hind III 、 Alu I 等四種限制酶切割位點(diǎn)。下圖是轉(zhuǎn)基因延熟番茄培育過(guò)程的示意圖（a mpr為抗氨芐青霉素基因），其中1~ 4是培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，I 、II是相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答。

例1 在構(gòu)建含反義多聚乳糖醛酸酶基因的表達(dá)載體時(shí)，若用Sma I與Pst I完全酶切含目的基因的DNA后，反應(yīng)管中有________種片段。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，實(shí)際操作中，一般應(yīng)選用限制酶___________，分別同時(shí)對(duì)_____________進(jìn)行切割。
例2 通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可將帶有目的基因的T-DNA（重組質(zhì)粒）導(dǎo)入番茄細(xì)胞。導(dǎo)入番茄細(xì)胞的目的基因，通常插入到細(xì)胞核某一條染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以____________________。上述途徑所獲得的番茄，其后代并非每一個(gè)個(gè)體都含目的基因，原因是                   。
(3) 為了檢測(cè)番茄細(xì)胞是否導(dǎo)入了目的基因，可以采用特定的DNA分子探針進(jìn)行檢測(cè)，也可以向植物組織培養(yǎng)基中加入_______________，以篩選獲得導(dǎo)入上述重組質(zhì)粒的特定受體細(xì)胞。
向正常番茄細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入反義多聚乳糖醛酸酶基因后，發(fā)現(xiàn)多聚乳糖醛酸酶基因能正常轉(zhuǎn)錄形成mRNA，但細(xì)胞內(nèi)卻不再合成多聚乳糖醛酸酶（PG），其原因最可能是____________。

Answer 1

(1)   3   Pst I和Hind III ,  醛酸酶基因和質(zhì)粒（目的基因和載體）
（2）在番茄體內(nèi)表達(dá)，在形成配子的減數(shù)分裂過(guò)程中，等位基因發(fā)生了的分離
（3）氨芐青霉素
（4）多聚乳糖醛酸酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA被反義多聚乳糖醛酸酶基因
轉(zhuǎn)錄形成的mRNA所降解（RNA干擾）

解析