Question

35.（7分）棉鈴蟲是一種危害棉花的害蟲。我國科學工作者發現一種生活在棉鈴蟲消化道內的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死，而這種毒蛋白對人畜無害。通過基因工程方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉入棉花植株并成功表達，棉鈴蟲吃了這種轉基因棉花的植株后就會死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚細胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優點是操作簡便，省去了組培的復雜過程。

（1）利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞，此過程是基因操作的基本步驟中的第三步，即                  。構建基因表達載體時要把目的基因整合到Ti質粒的T-DNA上，其原因是                    。

（2）基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運載體上。限制酶可以識別特定的DNA序列，并切斷         鍵。下列所示的黏性末端是由         種限制酶作用產生的。

（3）用標記的特異性抗體可以直接檢測毒蛋白，這種檢測方法稱為                 。

也可在宏觀性狀水平檢測該目的基因是否表達，方法是                  。已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞                 。

Answer 1

【答案】

35.（7分）

（1）將重組DNA導入受體細胞  Ti質粒能將目的基因整合到棉花染色體上   

（2）磷酸二酯鍵    4

（3）抗原-抗體雜交     讓害蟲吃棉花，觀察害蟲的生存狀態      表面無特異性受體

【解析】利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞，相當于基因工程操作步驟中的第三步——“將目的基因導入受體細胞”。據圖分析限制性核酸內切酶的識別序列為GAATT 、CAATT、GTTAA、CTTAA這4種，而酶具有專一性，故需4種不同的限制性核酸內切酶。目的基因的檢測與鑒定相關方法為：通過分子雜交技術檢測轉基因生物的DNA是否插入了目的基因及目的基因是否轉錄出mRNA。