Question

【題目】某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題：

(1)培養基中加入化合物A的目的是________________，這種培養基屬于__________培養基。

(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養基中的____________。實驗需要振蕩幾次進行培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是__________。

(3)轉為固體培養基時，常采用平板劃線的方法進行接種，在進行下一區域劃線前要將接種環____________________。

(4)研究人員統計污水池中“目的菌”的總數，選用10－4、10－5、10－6稀釋液進行涂布平板，每種稀釋液都設置了3個培養皿。從設計實驗的角度看，還應設置的一組對照實驗是_____________________，此對照實驗的目的是______________________________。

(5)研究人員采用平板劃線法純化水樣中分離出的細菌。操作時，在第二次及以后的劃線，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是________________________________。

劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的平行線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區域所劃的第一條平行線上無菌落，其他平行線上有菌落。造成第一條平行線無菌落可能的操作失誤有_____________________。

(6)在示意圖A和圖B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養后得到的結果。

Answer 1

【答案】 篩選目的菌 選擇 化合物A 異養需氧型 灼燒并冷卻 不接種的空白培養基 檢驗培養基制備過程中是否被雜菌污染 將聚集的菌種逐步稀釋以便獲得單個菌落 接種環灼燒后未冷卻，劃線未從第一劃線區域末端開始 B

【解析】試題分析：閱讀題干和題圖可知，本題是利用微生物培養的知識分離高效降解化合物A的細菌，先分析題圖了解分離高效降解化合物A的細菌的過程，然后根據問題的具體內容梳理相關知識點分析解答，圖A是平板劃線法，圖B是稀釋涂布平板法。

（1）培養基中加入化合物A是為分解化合物A的微生物提供碳源和氮源，分離出能分解化合物A的微生物；這中培養基從功能上分屬于選擇培養基。（2）分析培養基的配方可知，該培養基由化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成，因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源；目的菌是需氧微生物，因此在培養過程中應該震蕩培養，增加培養液中的溶氧量滿足微生物對氧氣的需求。

（3）平板劃線操作的工具是接種環，對于接種環的滅菌方法應該是灼燒滅菌。

（4）實驗設計過程應遵循對照原則，該實驗還應增設一組不接種的空白培養基作為對照，以證明培養基制備是否被雜菌污染。

（5）對接種環常用的滅菌方法是灼燒滅菌；在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是：將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細胞繁殖而來的菌落。接種環在使用前和每一次劃線后要進行灼燒滅菌，造成劃線無菌落可能的操作失誤可能是：接種環灼燒后未冷卻而燙死菌種或劃線未從第一區域末端開始。

（6）分析題圖可知，A培養皿采用的接種方法是平板劃線法，B培養皿采用的接種方法是稀釋涂布平板法。