Question

【題目】將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如下圖所示（注:農桿菌中Ti質拉上只有T—DNA片段能轉移到植物細胞中）。

（1）過程①需用同種____________酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切。為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來，應使用____________培養基。

（2）過程⑤中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養，旨在讓____________進入棉花細胞；除盡農桿菌后，還須轉接到含卡那霉素的培養基上繼續培養，目的是________________________。

（3）過程④中部分接種在無激素培養基上的芽也能長根，原因是_______________________。

（4）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用方法是____________。種植轉基因抗蟲棉能減少__________的使用，以減輕環境污染。

Answer 1

【答案】限制性核酸內切 選擇 T-DNA 篩選獲得T-DNA片段的植物細胞 頂芽端合成的生長素向基部運輸，促進根的分化 投放棉鈴蟲 農藥

【解析】

分析圖形可知本題是基因工程和植物組織培養相結合培養轉基因植株的過程，基因表達載體的構建是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。此過程要用相同的限制酶切割目的基因和質粒，使之有相同的黏性末端，這樣才能連接。常用的導入受體植物細胞的方法是農桿菌轉化法。

（1）為了使Bt基因的DNA和Ti質粒可以連接，一般用相同的限制酶切割二者出相同的黏性末端。篩選出農桿菌要用與標記基因對應的選擇培養基。

（2）農桿菌轉化法利用的是農桿菌的Ti質粒上有一段可轉移的T-DNA，將目的基因插入到T-DNA中，使之進入植物細胞的染色體DNA上，從圖中看出在Ti質粒上有卡那霉素抗性基因，因此可以用含卡那霉素的培養基上培養篩選獲得T-DNA片段的植物細胞。

（3）芽自身可以合成生長素向下運輸，促進根的分化。

（4）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀可以用個體生物學水平鑒定，即投放棉鈴蟲看棉鈴蟲的生存狀態。種植轉基因抗蟲棉可以抵御棉鈴蟲的侵害，減少農藥的使用，從而減輕環境污染。