Question

(9分)通過基因工程的方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉入棉花植株并獲得成功表達。棉鈴蟲吃了這種轉基因棉花的植株后就會死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚體細胞中，借助天然的種胚系統，形成含有目的基因的種胚。請回答下列問題：

(1)下列所示的黏性末端是由__________（2分）種限制酶作用產生的。

(2)利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞，此過程是基因工程操作步驟中的第三步，即__________。獲取目的基因時，如果基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以通過DNA合成儀用化學方法直接__________。

(3)該目的基因在導入受體細胞前需要與載體結合，目前經常使用的載體是__________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技術是__________；其次還要檢測__________，方法同樣是采用分子雜交技術；最后檢測__________，方法是__________雜交。

 

Answer 1

【答案】

（1）4   （2）將目的基因導入受體細胞     人工合成

（3）質粒（其他合理答案也可）

（4）DNA分子雜交技術     基因是否轉錄出了mRNA     目的基因是否翻譯成蛋白質    抗原-抗體

【解析】

試題分析：(1)據圖分析限制酶的識別序列為GAATT、CAATT、GTTAA、CTTAA這4種，而酶具有專一性，故需4種不同的限制酶。

(2) 基因工程操作步驟中的第三步為將目的基因導入受體細胞，植物基因工程中一般利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞。如果基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成。

(3)基因工程的操作工具中常用的運載體有質粒、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒等，目前經常使用的是質粒。

(4) 基因工程中分子水平上的檢測的方法有：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質——抗原—抗體雜交技術。

考點：本題考查了基因工程相關知識，意在考查考生能識記并理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成一定知識網絡的能力。