Question

【題目】下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉索抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進行。能驅(qū)動人乳鐵蛋白基因的乳腺細胞中特異性表達的調(diào)控因子是圖中的 。過程①采用的操作方法通常是 。

（2）過程②采用的生物技術(shù)是_______。對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體。目前最常見的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵 胎。

（3）為檢測人乳鐵蛋白基因是否成功表達，可采用 技術(shù)。

（4）對代孕牛的要求是 。

Answer 1

【答案】

（1）HindⅢ和BamHⅠ 氨芐青霉 啟動子 顯微注射法。

（2）胚胎移植 雙（1分）

（3）抗原—抗體雜交

（4）有健康體質(zhì)和正常繁殖能力

【解析】

試題分析：

（1）圖中信息顯示：人乳鐵蛋白基因的兩端和載體上都有BamHⅠ和HindⅢ的酶切位點，因此將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。因人乳鐵蛋白基因的插入，使得重組載體中的四環(huán)素抗性基因（tetR）遭到破壞，但氨芐青霉索抗性基因（ampR）結(jié)構(gòu)完好，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌，首先需要在含氨芐青霉的培養(yǎng)基上進行。啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，據(jù)此可知：能驅(qū)動人乳鐵蛋白基因的乳腺細胞中特異性表達的調(diào)控因子是圖中的啟動子。過程①是將重組載體導(dǎo)入供體牛的受精卵中，采用的操作方法通常是顯微注射法。

（2）過程②是將早期胚胎移入受體，采用的生物技術(shù)是胚胎移植。采用胚胎分割技術(shù)對早期胚胎進行切割從而獲得新個體，目前最常見的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵雙胎。

（3）人乳鐵蛋白基因是目的基因，檢測目的基因是否成功表達，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。 （4）在胚胎移植時，對受體（代孕牛）的要求是有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力。