Question

38.【生物—生物技術實踐】（本題共15分）

某中學楊老師自制大蒜提取液，希望這種簡便、經濟的提取液能夠高效的殺滅餐具上的細菌，楊老師完成了下面的探究實驗：

（1）制作提取液：楊老師將大蒜榨汁后制成提取液，具體做法如下表所示。請根據表中數據，在表中的括號內填出1#提取液應加入的冷開水量：

大蒜提取液編號	1#	2#
大蒜（g）	350	350
冷開水（mL）	（   ）	880
無色食醋（mL）	/	20

（2）使用方法：將餐具浸泡在提取液中10min后取出沖洗。

（3）樣品抽取：將經過         處理的濾紙貼在餐具表面1min，然后再將濾紙放到50ml無菌水中，充分振蕩后制成原液。再取1ml原液加入    ml無菌水中搖勻制成10倍稀釋液。

（4）分離及培養：用       分離法分離細菌。分別取1ml原液和10倍稀釋液，分別加到伊紅-美藍培養基中，用滅菌、消毒后的          （用具），將原液和稀釋液均勻涂布到整個平板上。每個濃度各做三個培養皿，其目的是                    。本實驗另設1ml無菌水涂布在未接種的培養皿為空白對照，原因是排除           。最后在37℃培養48h。

（5）觀察記錄：在下面的空白處，設計1#提取液實驗組的觀察記錄表：（2分）

（6）結果分析：統計數據，得到消毒前后的菌落總數變化（單位cfu/cm²，每平方厘米樣品中含有的細菌群落總數）（每空2分）

		總份數	＜1	1-10	10-102	102-103	103-104	＞104
1#提取液	消毒前	30	0	0	0	3	18	9
	消毒后	30	14	12	4	0	0	0
2#提取液	消毒前	33	2	0	0	3	12	16
	消毒后	33	19	10	4	0	0	0

根據消毒前后的數據可知：                               

2#提取液效果高于1#，分析可能的原因：                                      。

請你給楊老師提出需要進一步研究的問題：                                   。

Answer 1

【答案】（1）900        （3）滅菌；9ml

（4）涂布分離（稀釋涂布平板）（只寫“涂布”不得分） 玻璃刮刀（三角刮刀、涂布器）；重復實驗，減小實驗誤差；滅菌不徹底對本實驗的影響

（5）(原液、稀釋液1分；平均值1分) （2分）

	菌  落  數
	1號培養皿	2號培養皿	3號培養皿	平均值
原  液
10-1稀釋液

（6）（每空2分）大蒜提取液能夠高效殺菌；無色食醋促使大蒜提取液成微酸性，協同殺菌

（如：①進一步探究同等條件下，醋和蒜汁哪種消毒作用更好？②不同濃度的大蒜汁,哪種消毒效果更好？③醋作用的最適PH？）

【解析】1#與2#只有一個變量不同，即無色食醋，其余的量都應該是相同的。將濾紙無菌處理，可避免濾紙上所帶細菌對實驗結果的影響。要制成10倍稀釋液，因此1ml原液加入9ml無菌水。分離細菌多用涂布分離(稀釋涂布平板法)分離，用滅菌、消毒后的玻璃刮刀（三角刮刀、涂布器），將原液和稀釋液均勻涂布到整個平板上，每個濃度多做幾組實驗以減少誤差。本實驗另設1ml無菌水涂布在未接種的培養皿為空白對照，以排除滅菌不徹底對本實驗的影響。由圖中數據可以看出大蒜提取液能夠高效殺菌，而且有無色食醋的情況下，殺菌效果更好。本實驗只探究了醋和蒜汁的有無對殺菌效果的影響，沒有考慮濃度、PH值等的影響，這可以做為下一步的探究方向。