Question

【題目】苯酚及其衍生物廣泛存在于工業廢水中，對環境有嚴重危害。小明同學準備依據下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題:

（1）酚降解菌富集培養基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有_____________。

（2）將采集到的樣品接種培養，苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸_____________。以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應進一步_____________，以便于菌落計數與分離。制備平板培養基時除了需要水、營養物質外，還必須添加_____________。

（3）下圖為連續劃線法示意圖，在圖中_____________ （填圖中序號）區域更易獲得單菌落。

（4）采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應，下表中1 ~5號比色管的苯酚濃度應分別為_____________。

管號	1	2	3	4	5	6
苯酚濃度（mg/ L）						1

如果廢水為50 mg/ L 苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋_____________ （填序號：①5 ②10 ③20）倍后，再進行比色。

Answer 1

【答案】 蛋白胨、苯酚 增加 稀釋涂布 凝固劑 ③ 0、0.2、0.4、0.6、0.8 ③

【解析】（1）碳源是微生物生長的一類營養物，是含碳化合物，其中可作為碳源的有蛋白胨和苯酚。（2）將采集到的樣品接種培養的目的是富集酚降解菌，則苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸增加。平板中菌落過于密集，說明菌種密度過大，應進一步稀釋。平板培養基呈固態，應向其中添加凝固劑。（3）下一次劃線的起始端是上次劃線的末端，隨著劃線的進行，菌種的密度越來越小，更易形成單菌落，故③區域更易獲得菌落。（4）1號管為空白對照管，不加苯酚，6號管中苯酚濃度為1 mg/L，2~6號管苯酚濃為0~1 mg/L，可判斷濃度梯度為0.2 mg/L，則2~5號管中苯酚濃度分別是0.2、0.4、0.6、0.8mg/L。廢水中苯酚溶液濃度為50 mg/ L，降解后約有21%的苯酚殘留，則苯酚溶液濃度為10.5 mg/L，由于制作的比色管中苯酚濃度介于0~1 mg/L間，則殘留液需稀釋20倍后，再進行比色。