Question

【題目】心肌肌鈣蛋白（cardiac troponin，cTn）是心肌肌肉收縮的調節蛋白。cTn是由三種不同的亞基組成：心肌肌鈣蛋白T（cTnT）、心肌肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白C（TnC）。其中肌鈣蛋白I（cTnI）在血液中的含量上升提示心肌損傷。為制備cTnI的單克隆抗體（簡稱單抗），科研人員進行了如下過程：

請回答下列相關問題。

（1）每隔兩周需用cTnI作為抗原給小鼠注射一次，共注射三次，其目的是______________________________________，最后一次注射后的第三天，取脾臟內部分組織制成細胞懸液與骨髓細胞進行誘導融合，常用的生物誘導因素是__________________。

（2）甲、乙、丙中，只含雜交瘤細胞的是__________________，②過程表示將乙細胞接種到多孔培養板上，進行抗體陽性檢測，之后稀釋、培養、再檢測，并多次重復上述操作，其目的是篩選能產生________________的抗cTnI單抗的雜交瘤細胞。

（3）在體外培養雜交瘤細胞時，培養液中除了要加入營養物質外，還要置于一定的氣體條件下，其中CO2的主要作用是____________________________。

Answer 1

【答案】加強免疫，刺激小鼠機體產生更多的淋巴細胞 滅活的病毒 乙和丙 特異性強、靈敏度高 維持培養液的pH

【解析】

1、單克隆抗體：由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。具有特異性強、靈敏度高，并可能大量制備的特點。
2、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內，使其發生免疫，小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產生特定抗體的雜交瘤細胞。
3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準確、高效、簡易、快速的優點。②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導彈”。

（1）每隔兩周用cTnI作為抗原給小鼠注射一次，共注射三次，其目的是增強免疫，刺激小鼠產生更多的B淋巴細胞；誘導動物細胞融合常用的生物誘導因素為滅活的病毒。

（2）B淋巴細胞和骨髓瘤細胞經過誘導融合后，可形成三種融合細胞和兩種未融合的細胞，①過程是為了篩選獲得雜交瘤細胞，②過程表示將乙細胞接種到多孔培養板上，進行抗體陽性檢測，之后稀釋、培養、再檢測，并多次重復上述操作，其目的是篩選獲得能產生特異性強、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細胞。看圖可知：雜交瘤細胞需要對甲進行篩選，因此乙和丙應該是篩選得到的雜交瘤細胞。

（3）動物細胞培養時，加入CO2的主要作用是維持培養液的pH。