Question

【題目】酵母菌生長的最適宜溫度在20～30℃之間，能在pH為3～7.5的范圍內生長，在氧氣充足的環境中主要以出芽生殖的方式快速增殖，大約每1.5～2小時增殖一代。某研究性學習小組據此探究酵母菌種群在不同的培養液濃度和溫度條件下種群密度的動態變化，進行了如下實驗，實驗操作步驟如下：

第一步：配制無菌馬鈴薯葡萄糖培養液和活化酵母菌液。

第二步：利用相同多套裝置，在適宜條件下培養。

第三步：用血球計數板計數裝置中起始酵母菌數目，做好記錄。

第四步：將各裝置放在其他條件相同且適宜的條件下培養。

第五步：連續7天，每天隨機抽時間取樣計數，做好記錄。

回答下列問題：

（1）改正實驗操作步驟中的一處錯誤：_____。

（2）某同學第5天在使用血球計數板計數時做法如下：

①搖勻試管，取1mL培養液并稀釋10倍（稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍染液）。

②先將_____放在計數室上，用吸管吸取稀釋后的培養液滴于其邊緣，讓培養液自行滲入，多余培養液用吸水紙吸干，制作好臨時裝片。

③顯微鏡下觀察計數：在觀察計數時只記_____（填“被”或“不被”）染成藍色的酵母菌。

（3）若在顯微鏡下觀察計數某一小方格時，活菌分布如下圖所示，則記錄的數目是_____個。若平均每個樣方中的酵母菌數目就是該數目，所使用的血球計數板有16個中方格，每1中方格中有25個小方格，每1個大方格容積為0.1mm3（1mL=1 000mm3）．1 mL培養液中酵母菌細胞個數_____。

（4）在實驗過程中，培養液的pH值變化為_____。

（5）實驗結束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數板的做法是否正確__________。

（6）在該實驗的基礎上，根據你對影響酵母菌種群生長的因素的推測，進一步確定一個研究實驗的課題。_________________________________________。

Answer 1

【答案】 第五步中應為每天同一時間取樣 蓋玻片 不被 8 3.2×108 逐漸變小 不正確 酵母菌的種群數量與營養物質（代謝廢物，pH，容氧量等）的變化關系

【解析】試題分析：本題綜合考查學生對探究培養液中酵母菌種群數量變化的實驗原理、操作流程、注意事項掌握情況對實驗數據的處理能力。熟記并理解相關的基礎知識，據此結合題意，對相關問題進行解答。

(1)為了避免無關變量的干擾，實驗中無關變量應控制相同且適宜。該實驗第五步中的每天取樣時間為無關變量，因此要注意在每天同一時間取樣。否則，會因取樣時間不同而影響結果準確性。

(2) ②在對酵母菌數量進行抽樣檢測時，應從振蕩搖勻的試管中取1mL培養液并適當稀釋，然后將蓋玻片放在計數室上，用吸管吸取稀釋后的培養液滴于其邊緣，讓培養液自行滲入，多余培養液用吸水紙吸干，制作好臨時裝片。③在顯微鏡下觀察計數時，由于死的酵母菌細胞膜失去選擇透過性，因此被染成藍色，而活的酵母菌不會被染色，因此計數時只記不被染成藍色的酵母菌。

(3)對某一小方格中的酵母菌計數時，應統計方格內和相鄰兩邊及其頂角上的酵母菌，據此分析圖示可知，記錄的數目是8個。如所使用的血球計數板有16個中方格，每l中方格中有25個小方格，每1個小方格容積為0.1mm3（1mL=1000mm3）；已知每個小方格平均有8個酵母菌，則1mL培養液中酵母細胞個數＝8×1000×10×25×16÷0.1＝3.2×108個。

(4)在實驗過程中，由于酵母菌呼吸產生二氧化碳，使得培養液的pH值會逐漸變小。

(5) 實驗結束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數板的做法是不正確的，因為血球計數板上的刻度較精細，用試管刷蘸洗滌劑擦洗會破壞血球計數板的刻度，而應將血球計數板進行浸泡和沖洗。

(6)本題研究培養液中酵母菌種群數量與時間的關系。依據影響種群數量的變化因素，可進一步確定的研究實驗課題為：酵母菌的種群數量與營養物質（代謝廢物、PH、容氧量等）的變化關系。