Question

【題目】基因工程中，需使用特定的限制性核酸內切酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制性核酸內切酶I的識別序列和切點是一G↓GATCC一，限制性核酸內切酶Ⅱ的識別序列和切點是一↓GATC一，根據圖示判斷下列敘述正確的是( )

A．用限制性核酸內切酶Ⅱ切割獲得目的基因時，有2個磷酸二酯鍵被水解

B．質粒用限制性核酸內切酶I切割，形成2個黏性末端

C．目的基因用限制性核酸內切酶Ⅱ切割，有8個氫鍵被破壞

D．酶I和酶Ⅱ切割后獲得的黏性末端相同，只能用T4DNA連接酶來連接

Answer 1

【答案】B

【解析】根據題意分析圖形可知，在限制性核酸內切酶I的識別序列內部含有限制性核酸內切酶Ⅱ的識別序列和切點，若用限制性核酸內切酶Ⅱ切割獲得目的基因時，則目的基因的前后各有一個該限制酶的識別序列和切割位點，因此會有4個磷酸二酯鍵被水解，A錯誤；質粒中只含有1個限制酶I切割的識別序列，位于標記基因GeneⅡ的內部，因此若用限制性核酸內切酶I切割，會形成2個黏性末端，B正確；目的基因用限制性核酸內切酶Ⅱ切割，形成2個黏性末端，其中每個A-T之間有2個氫鍵被破壞，每個G-C之間有3個氫鍵被破壞，故共有2x2+3x2=10個氫鍵被破壞，C錯誤；酶I切割后獲得的黏性末端，而酶Ⅱ切割后獲得的是平末端，D錯誤。