Question

【題目】為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。

（1）配制好的培養基滅菌通�？梢允褂�_________法。步驟③與步驟②中培養基成分的最大區別是_______________________________。

（2）同學甲進行過程④的操作，其中一個平板經培養后的菌落分布如圖B所示。該同學的接種方法是___________；推測同學甲用此方法接種時出現圖B結果可能的操作失誤是________________；在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是____________________。

（3）同學乙也按照同學甲的接種方法進行了過程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為56、58和57。據此可得出每升樣品中的活菌數為________________。

（4）步驟⑤需要震蕩培養其目的是提高培養液溶氧量，同時使__________，提高營養物質利用率。

（5）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是____________________。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌 石油是唯一碳源 稀釋涂布平板法 涂布不均勻 檢測培養基平板滅菌是否合格 5.7×107 菌體與培養液充分接觸 篩選出分解石油能力最好的細菌

【解析】本題考查分解石油的細菌的篩選，要求考生明確微生物的接種、篩選方法，能根據所學知識分析操作流程圖，篩選出所需要的石油分解菌，并能對計數結果進行計算。

（1）根據題意，要分離和純化高效分解石油的細菌，配制好的培養基滅菌通�？梢允褂酶邏赫羝麥缇�法。圖中步驟②是擴大培養來自被石油污染過的土壤中細菌，步驟③是利用添加石油擴大培養分解石油的細菌，步驟③與步驟②中培養基成分的最大區別是步驟③的培養基中石油是唯一碳源。

（2）過程④是對分解石油的細菌進行分離，分析B圖可知，分解石油的細菌在培養基表面分布較為均勻，說明同學甲進行過程④的操作中接種方法是稀釋涂布平板法；圖B中培養基表面左側的菌落數目明顯比右側多，推測同學甲用此方法接種時出現圖B結果可能的操作失誤是接種時涂布不均勻；在接種前需隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格。

（3）同學乙也按照同學甲的接種方法進行了過程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為56、58和57。據此可得出每升樣品中的活菌數為（56+58+57）30.1x100x1000=5.7×107。

（4）步驟⑤需要震蕩培養其目的是提高培養液溶氧量，同時使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質利用率。

（5）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最好的細菌，其中石油剩余量最少的一組所含的細菌就是分解石油能力最好的細菌。