Question

【題目】基因工程的設(shè)計(jì)和操作中，啟動(dòng)子是運(yùn)載體的重要組成部分．如圖是一種克隆啟動(dòng)子的辦法，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：
（1）啟動(dòng)子是識(shí)別和結(jié)合的部位．若要獲得啟動(dòng)子的堿基序列不能依據(jù)基因表達(dá)產(chǎn)物推知，原因是 ．
（2）過(guò)程①、③分別使用的限制酶是 ．
（3）過(guò)程④的原理是 ， 需要用到的工具酶是 ．
（4）過(guò)程⑤中克隆的啟動(dòng)子與外源基因連接時(shí)，根據(jù)設(shè)計(jì)引物a．

Answer 1

【答案】
（1）RNA聚合酶；基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄
（2）BamHⅠHindⅢ
（3）DNA雙鏈復(fù)制；Taq酶等熱穩(wěn)定聚合酶
（4）外源基因的核苷酸序列
【解析】解：（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄，因此要獲得啟動(dòng)子的堿基序列不能依據(jù)基因表達(dá)產(chǎn)物推知．（2）根據(jù)過(guò)程①后的結(jié)果可知，該過(guò)程使用的限制酶是BamHⅠ；根據(jù)過(guò)程③的結(jié)果可知，該過(guò)程使用的限制酶是HindⅢ．（3）過(guò)程④采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，其原理是DNA雙鏈復(fù)制；PCR操作是在較高溫度下進(jìn)行的，因此需要用到的工具酶是Taq酶等熱穩(wěn)定聚合酶．（4）PCR技術(shù)的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物．因此，過(guò)程⑤中克隆的啟動(dòng)子與外源基因連接時(shí)，根據(jù)外源基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物a．

所以答案是：（1）RNA聚合酶 基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄 （2）BamHⅠHindⅢ（3）DNA雙鏈復(fù)制 Taq酶等熱穩(wěn)定聚合酶（4）外源基因的核苷酸序列

【考點(diǎn)精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)才能正確解答此題．