Question

【題目】中國(guó)苦蕎富含黃酮類化合物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在降血糖、降血脂等方面功效顯著．查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類化合物合成的關(guān)鍵酶，如圖為將修飾后的CHS基因?qū)�入苦蕎，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系示意圖．

（1）要對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌應(yīng)采用的滅菌方法是__．接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察是否形成菌落，目的是__．

（2）接種前，外植體用__和0.1%的氯化汞溶液進(jìn)行消毒后都需經(jīng)無(wú)菌水清洗．接種后2﹣5天，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是__．

（3）過(guò)程②叫做__，通過(guò)②和③過(guò)程能成功地把離體的苦蕎體細(xì)胞能培育成植株，此技術(shù)所利用的原理是__．

（4）判斷轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，可比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量，也可通過(guò)凝膠色譜法分離測(cè)定細(xì)胞中CHS含量，由于CHS__，所以最先從色譜柱中洗脫出來(lái)，工業(yè)化生產(chǎn)中，可利用__技術(shù)以提高CHS的利用率而節(jié)約成本．

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌 判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底 70%的酒精 外植體消毒不徹底 脫分化 植物細(xì)胞的全能性 相對(duì)分子量大 固定化酶（固定化細(xì)胞）

【解析】基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定．其中構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，需要限制酶和DNA連接酶。植物組織培養(yǎng)技術(shù)包括脫分化和再分化兩個(gè)重要過(guò)程，而決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要。

（1）培養(yǎng)基徹底滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法；為了判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，接種前應(yīng)該用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察是否形成菌落。

（2）外植體是植物組織培養(yǎng)的對(duì)象，應(yīng)該用70%的酒精進(jìn)行消毒；若接種后2-5天，發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是外植體消毒不徹底。

（3）圖中過(guò)程②表示脫分化形成愈傷組織的過(guò)程；③過(guò)程表示再分化，通過(guò)②和③過(guò)程將離體的苦蕎體細(xì)胞培育成完整植株的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

（4）通過(guò)凝膠色譜法分離測(cè)定細(xì)胞中CHS含量時(shí)，由于CHS相對(duì)分子量大，所以最先從色譜柱中洗脫出來(lái)；工業(yè)化生產(chǎn)中，可利用固定化酶（或固定化細(xì)胞）技術(shù)以提高CHS的利用率而節(jié)約成本。