Question

【題目】農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤。為修復被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌。已知該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。

A B C D

(1) 微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是________，應(yīng)該在________旁完成。圖中B、C所示操作的目的是將聚集的菌種逐步________。

(2) 在選育過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以________為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上。為了篩選出高效的目的菌，可比較單菌落周圍透明圈的大小。實驗結(jié)果如右圖顯示的A～E五種菌株中，________是最理想菌株。

(3) 若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù)，可采用的接種方法是________。對分離的細菌數(shù)目統(tǒng)計時，統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目________。

(4) 操作過程中有三種材料或用具需要消毒或滅菌：①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②操作者的雙手；③玻棒、試管、燒瓶和吸管。其中需要滅菌的是________。(填序號)

Answer 1

【答案】(1) 無菌操作 酒精燈火焰 稀釋獲得單個菌落

(2) 該除草劑 E (3) 稀釋涂布平板法 少 (4) ①③

【解析】（1）微生物接種的技術(shù)核心是無菌操作，避免雜菌污染，應(yīng)該在酒精燈火焰旁或無菌操作臺上完成。B操作為平板劃線，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到由一個細胞發(fā)育繁殖而來的單個菌落。

（2）該實驗是選育降解該除草劑的細菌，所以培養(yǎng)基上應(yīng)以該除草劑為唯一氮源。透明圈越大，說明細菌降解的除草劑越多，即E效果最好，為最理想菌株。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個細胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。由于可能有沒有分散的細胞，或培養(yǎng)出的菌落彼此有重疊區(qū)域，則導致計數(shù)偏低。

（4）雙手無法滅菌，應(yīng)采用消毒的方式減少手上的雜菌。但其他所有器皿，為保證不被雜菌污染，都需要滅菌。