Question

【題目】某質粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質粒獲得轉基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。

（1）在構建重組質粒時，應選用兩種限制酶對進行切割，然后進行連接，以保證重組DNA序列的唯一性。
（2）為篩選出導入了重組質粒的農桿菌，應在培養(yǎng)基中加入 ， 理由是。
（3）將轉入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用技術，即通過
和兩個主要過程最終形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質外還必須向培養(yǎng)基中添加。

Answer 1

【答案】
（1）SalⅠ和HindⅢ；質粒和抗鹽基因的DNA
（2）氨芐青霉素；重組質粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環(huán)素基因被破壞
（3）植物組織培養(yǎng)；脫分化；再分化；植物激素(植物生長調節(jié)劑或生長素和細胞分裂素)
【解析】（1）在構建重組質粒時，應保證質粒中的標記基因至少保留一個不被破壞，且切割后質粒與目的基因具有2的末端，還要避免質粒自身相連，所以應選用SalⅠ和HindⅢ兩種限制酶對質粒和抗鹽基因的DNA進行切割，然后進行連接，以保證重組DNA序列的唯一性。（2）為篩選出導入了重組質粒的農桿菌 ，應在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素，理由是重組質粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環(huán)素基因被破壞。（3）將轉入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用植物組織培養(yǎng)技術，即通過脫分化和再分化兩個主要過程最終形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質外還必須向培養(yǎng)基中添加植物生長調節(jié)劑或生長素和細胞分裂素，以誘導再分化的方向。
【考點精析】認真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(基因工程的原理是利用DNA重組技術)．