Question

【題目】某轉基因牛的生產技術流程如圖。請回答：

（1）利用過程①方法構建的基因文庫與基因組文庫相比,最顯著的特征是不含___________。采用PCR技術大量擴增此目的基因的前提是___________，以便合成引物;擴增過程中溫度呈周期性變化，冷卻后繼續加熱到70-75℃的目的是______________________。

（2）轉入生長激素基因的牛可通過乳腺細胞分泌乳汁來生產人生長激素，過程②中，將目的基因與____的啟動子等調控組件重組在一起構建重組質粒，通過___________________法導入受精卵中，然后利用胚胎工程的___________(答出2項)技術手段獲得轉基因牛。

（3）該轉基因牛進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁來生產人的生長激素，因而稱作___________反應器。若該轉基因牛的乳汁中并未含有人的生長激素，可能的原因是______________________。

Answer 1

【答案】內含子和啟動子 要有一段巳知目的基因的核苷酸序列使 Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成乳腺蛋白基因顯微注射早期胚胎培養、胚胎移植乳腺生物（乳房生物）目的基因未成功導入（或導入的目的基因未能準確表達）

【解析】

據圖分析，圖示為利用基因工程生產轉基因牛的過程，涉及到的技術有基因工程、早期胚胎培養技術、胚胎移植技術等；圖中過程①表示利用反轉錄法獲得目的基因（生長激素基因）的過程，過程②表示構建基因表達載體的過程，是基因工程的核心步驟，基因表達載體的組成成分包括啟動子、終止子、目的基因、標記基因等。

（1）真核基因的結構包括非編碼區和編碼區，編碼區包括外顯子和內含子，非編碼區的上游含有啟動子、下游含有終止子。利用過程①反轉錄法獲得的目的基因只有外顯子對應的片段，因此利用該方法獲得的基因文庫與基因組文庫相比，沒有內含子和啟動子。采用PCR技術擴增目的基因的前提條件是要有一段巳知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物；擴增過程中，冷卻后繼續加熱到70-75℃的目的是使 Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成。

（2）根據題意分析，轉入生長激素基因的牛可通過乳腺細胞分泌乳汁來生產人生長激素，所以應該將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子、終止子等調控組件重組在一起構建重組質粒，再通過顯微注射法將重組質粒導入受精卵中，然后利用早期胚胎培養技術形成早期胚胎，再利用胚胎移植技術等獲得轉基因牛。

（3）由于可以通過轉基因牛的乳汁生產人的生長激素，因此轉基因牛可以稱作為乳腺生物反應器；若該轉基因牛的乳汁中并未含有人的生長激素，可能是因為目的基因未成功導入，也可能是因為導入的目的基因未能準確表達。