Question

【題目】若要利用某目的基因（見圖甲）和P1噬菌體載體（見圖乙）構建重組DNA（見圖丙），限制性核酸內切酶的酶切位點分別是BglⅡ（A↓GATCT）、EcoRⅠ（G↓AATTC）和Sau3AⅠ（↓GATC）。下列分析合理的是（ ）

A. 用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

Answer 1

【答案】D

【解析】用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，產生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時可能會發生反向連接，A錯誤；用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因會產生兩種DNA片段，一種含有目的基因，一種不含目的基因，且有目的基因的片段與載體結合時容易發生反向連接，B錯誤；用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，也能產生相同的黏性末端，可能會發生反向連接，C錯誤；只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，產生不同的黏性末端，防止發生反向連接，這樣目的基因插入載體后，RNA聚合酶的移動方向肯定與圖丙相同，D正確。