Question

【題目】科研人員從荒漠植物中成功克隆抗早功能基因培育出抗旱耐鹽堿和耐貧瘠能力明顯的轉基因紫花苜蓿新品系，它的研究成功對改良與利用大面積鹽荒地、改善生態環境以及促進農牧業可持續發展具有現實意義。結合所學知識回答下列問題。

（1）題目中“克隆”是指______技術，其原理為_____________________。

（2）圖1為某種常用質粒的序列圖。Lac Z基因編碼的酶能使無色X-gal變為藍色，Ampr為氨卡青霉素抗性基因。圖2為目的基因的序列及其相關限制酶的識別序列�？蒲腥藛T欲用BamHⅠ和BamH Ⅱ兩種限制酶切割目的基因和質粒后，篩選成功導入目的基因的重組質粒，培養基中應加入的物質有___________和氨卡青霉素，構建重組質粒時需要的工具酶有__________________________。

（3）紫花苜蓿為雙子葉植物，常用的導入目的基因的方法是__________________。

（4）在對轉基因植物進行個體水平的檢測時，需將該植株栽培于__________環境中，以觀察其生長狀況。

（5）欲大規模的推廣新品系，科研人員將轉基因紫花苜蓿的__________制備成人工種子。

（6）在西北某些地區出現“前面造林，后面砍林”的現象，是因為發展中___________原理失調造成的。

Answer 1

【答案】 PCR DNA復制 X—gal 限制酶、DNA連接酶 農桿菌轉化法 干旱、鹽堿和貧瘠 胚狀體 整體性

【解析】試題分析：

分析題圖，質粒中抗氨芐青霉素抗性基因（Amp'）和LacZ基因都屬于標記基因，含有目的基因的外源DNA分子上存在BamHⅠ和BglⅡ兩種酶的酶切位點，質粒上存在BamHⅠ、BglⅡ和EcoRⅠ三種酶的酶切位點。一般為了防止目的基因和質粒反向連接，用兩種限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和質粒。

（1）題目中說的“克隆”實際上指的是PCR技術，即在分子水平上克隆DNA分子。

（2）由于LacZ基因編碼的酶能使無色的X-gal變為藍色，Amp為氨芐青霉素抗性基因，所以若要篩選成功導入目的基因的重組質粒，培養基中應加入的物質有X-gal和氨芐青霉素。構建基因表達載體時，首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA。

（3）將目的基因導入雙子葉植物常用農桿菌轉化法。

（4）若進行個體水平的檢測，需將該植株栽培于干旱、鹽堿和貧瘠環境中，以觀察其生長狀況。

（5）人工種子是由胚狀體包裹上人工種皮形成的。

（6）“前面造林，后面砍林”現象是只考慮自然效益，對社會效益和經濟效益未整體考慮，違背了整體性原理。