Question

【題目】血栓主要由不溶性的纖維蛋白等物質組成。納豆激酶(NK)是一種在納豆發酵過程中由納豆菌產生的蛋白酶，它不但能直接作用于纖維蛋白(A過程)，還能間接激活體內纖溶酶原(B 過程)。如圖是有關納豆激酶溶栓機理簡圖，請據圖回答問題：

【1】人們所需的納豆激酶必需通過分離提純才能獲得，下面是分離提純的步驟，其基本順序是_______________。

①層析提純 ②過濾 ③沉淀 ④破碎細胞 ⑤酶制劑 ⑥冷凍干燥

使酶蛋白沉淀通常采用改變pH或加入_____________。

【2】研究NK直接水解作用：給定纖維蛋白平板，將____________滴加其上，若出現相應的溶解圈，則可說明___________________________________________。

【3】NK 的間接作用是通過_____________________________________激活體內纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓。

【4】請根據下列給出的實驗材料，比較NK 與內源性纖溶酶溶栓效果，并在表格空白位置上，補全相應內容。

供選實驗材料：NK溶液、內源性纖溶酶溶液、纖維蛋白塊、蛋清溶液，緩沖液、雙縮脲試劑、量筒、試管和秒表。

實驗步驟：（“+”表示添加，“-”表示未添加）

	加入物質的成分	試管1	試管2
1	A	+	+
2	緩沖液	+	+
3	納豆激酶（NK）溶液	+	-
4	B	-	+

①表格中A處添加的物質是_____________，B處添加的物質是____________。

②實驗結果的鑒定所用的觀察方法是 _________________________________。

Answer 1

【答案】

【1】 ④②③①⑥⑤ 硫酸銨

【2】 納豆激酶（或NK） NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用(NK在體外有溶栓效果)

【3】刺激血管上皮細胞，釋放組織纖溶酶原激活劑

【4】 纖維蛋白塊 內源性纖溶酶溶液 觀察記錄蛋白塊消失的時間

【解析】

1、識圖分析可知，圖中納豆激酶(NK)一方面直接作用于纖維蛋白，使纖維蛋白降解，溶解血栓；另一方面納豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮細胞，使血管上皮細胞釋放組織纖溶酶原激活劑激活體內纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓。

2、分析題干信息可知，該實驗的目的是比較NK與內源性纖溶酶溶栓效果，因此實驗的自變量是酶的種類，因變量是纖維蛋白塊的消失的時間，其他如試驗用的纖維蛋白塊大小、緩沖液的濃度和體積、酶的濃度和體積屬于無關變量，無關變量應該保持一致。

【1】由題意知，納豆激酶（NK）是由納豆菌產生的蛋白酶，因此納豆激酶分離提純的過程是先破碎細胞釋放納豆激酶，然后經過過濾、沉淀，層析提純，再通過冷凍干燥獲得酶制劑，即④②③①⑥⑤；使酶蛋白沉淀的常用方法是改變PH或加入硫酸銨。

【2】分析題圖可知，納豆激酶（NK）能直接作用于纖維蛋白，使纖維蛋白降解；將納豆激酶（或NK）滴加在給定纖維蛋白平板上，可以檢驗納豆激酶（NK）直接降解纖維蛋白的作用，如果現相應的溶解圈，說明NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在體外有溶栓效果）。

【3】分析題圖可知，納豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮細胞，使血管上皮細胞釋放組織纖溶酶原激活劑激活體內纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓。

【4】①根據以上分析可知，該實驗的目的是比較NK與內源性纖溶酶溶栓效果，實驗的自變量是酶的種類，因變量是纖維蛋白塊的消失的時間，其他如試驗用的纖維蛋白塊大小、緩沖液的濃度和體積、酶的濃度和體積屬于無關變量，無關變量應該保持一致。因此A處加入的物質應該是纖維蛋白塊，B加入的物質是內源性纖溶酶溶液。

②通過比較蛋白塊消失的時間的長短比較NK與內源性纖溶酶溶栓效果。

本題以納豆激酶（或NK）的溶解血栓的機理為背景考查學生的獲取信息的能力以及解決問題的能力，要求學生能夠正確識圖分析，判斷出納豆激酶（或NK）的溶解血栓的機理的途徑，這是該題考查的重點；同時利用所學的酶的提純的知識點解決問題，掌握實驗設計的基本原則，能夠結合題意正確判斷實驗的目的，找出實驗的自變量、因變量和無關變量，這是該題第4小題解決的關鍵。