Question

（14分）某研究小組進行藥物試驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養細胞的毒性。供培養的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為肝腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關動物細胞培養的問題：

（1）將數量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養瓶中培養，培養液及其它培養條件均相同。一段時間后，觀察到甲細胞數量比乙細胞數量      ，因為甲具有　　　　特點。

（2）動物細胞培養時，常在合成培養基中加入適量血清，其原因是            。細胞培養應在含5% CO₂的恒溫培養箱中進行，CO₂的作用是                      。

（3）在兩種細胞生長過程中，當乙細胞鋪滿瓶壁時，其生長              。藥物試驗需要大量細胞，兩種細胞頻繁傳代，甲細胞比乙細胞可以傳代的次數更           。若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液，需用             消化處理。

（4）為了防止細胞培養過程中細菌的污染，可向培養液中加入適量的            。如細胞培養過程中要保存細胞，則通常在　　　　　　條件下，因為在這種條件下，細胞中　　      　的活性降低，細胞　　 　　　的速率降低。

（5）已知癌基因X過量表達與肝腫瘤的發生密切相關，要試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲細胞生長的影響，可將甲細胞分為A、B兩組，A組細胞培養液中加入           ，B組細胞培養液中加入無菌生理鹽水，經培養后，從A、B兩組收集等量細胞，通過分別檢測X基因在A、B兩組細胞中的           或            合成水平的差異，確定Y的藥效。

 

Answer 1

【答案】

（14分）（1）多  快速增殖

（2）血清可以補充合成培養基中缺乏的物質   維持培養液pH

（3）停止　多  胰蛋白酶

（4）抗生素    冷凍(或超低溫、液氮)  　酶  　　新陳代謝

（5）Y  mRNA   蛋白質

【解析】肝腫瘤細胞壁正常肝細胞的分裂能力強，細胞周期短，在其他條件相同時，相同時間內產生的子代細胞多，在動物細胞培養的過程中，需要加入適宜血清可以補充培養基中缺乏的物質，而5%CO₂的作用可以起到緩沖物質作用，維持培養液pH；正常動物細胞在培養瓶中培養是存在接觸抑制現象，當鋪滿瓶壁時就停止生長，腫瘤細胞則沒有接觸抑制現象，而且可以更多次的進行傳代；培養瓶中加入抗生素可以抑制細菌的活動；（5）中要設計的實驗是要實驗抗腫瘤藥物Y對甲細胞生長的影響，所以A、B兩組肯定是一組加入Y，一組不加；而腫瘤細胞與一般細胞之間的在合成水平上的差異在于腫瘤細胞會合成較多的蛋白質，同時也會形成較多的mRNA。