Question

【題目】噬菌體展示技術是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置，使外源基因隨噬菌體外殼蛋白的表達而表達，同時，外源蛋白或多肽隨噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面的生物技術。利用該技術可以獲得單克隆抗體(最新技術）。請問答下列問題：

（1）傳統單克隆抗體的獲得需先對小鼠進行_______處理，整個過程中涉及的現代科學技術有________。

（2）外源DNA片段含_________個游離的磷酸。為了得到大量的外源DNA，可使用PCR技術進行體外擴增，合成引物________(填“需要”或“不需耍”)知道整個外源DNA序列，合成的引物間不能進行堿基互補配對的原因是________________。

（3）噬菌體展示技術獲得的抗體還可用于定量檢測抗原，如雙抗體夾心法，具體原理如下圖所示：

分析上圖可知，固相抗體和酶標抗體均能與抗原結合，這是由于不同抗體可與同一抗原表面的______結合。該檢測方法中，酶標抗體的作用是__________，可通過測定產物量來推測抗原量。

（4）試說說噬菌體展示技術可能的局限性:_______________________。

Answer 1

【答案】 注射特定的抗原蛋白(免疫） 動物細胞培養、動物細胞融合 2 不需要 它們的模板分別位于外源DNA的兩端，而兩端的模板序列并不能進行堿基互補配對 不同部位 與待測抗原結合，酶催化檢測底物反應 不能展示對噬菌體或宿主細胞有毒的蛋白質，噬菌體的蛋白質無法被內質網和高爾基體等加工

【解析】試題本題以圖文的形式考查了動物細胞培養、動物細胞融合、單克隆抗體的制備的相關知識，意在考查學生的識圖、析圖能力及運用所學知識解決問題的能力。噬菌體展示技術是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置，使外源基因隨外殼蛋白的表達而表達，同時，外源蛋白隨噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面的生物技術。

（1）傳統單克隆抗體的獲得需從小鼠脾臟獲取效應B細胞前需對小鼠進行注射特定抗原蛋白處理，整個過程中涉及的現代科學技術有動物細胞培養、動物細胞融合。

（2）每個DNA分子的每條單鏈上各有一個游離的磷酸基團，因此外源DNA片段含2個游離的磷酸。一般情況下，我們需要大量的某一基因的片段時，我們在基因的兩端分別設計引物（一段一條），然后在體外，采用PCR的方法，用引物進行體外DNA復制，從而大量合成引物之間的基因。因此不需要知道整個外源DNA序列，只需要設計好引物，其余部分可通過堿基互補配對原則自動完成。由于引物的模板分別位于外源DNA的兩端，而兩端的模板序列并不能進行堿基互補配對，因此合成的引物間不能進行堿基互補配對。

（3）抗體與抗原的結合具有特異性，因此不同抗體可與同一抗原表面的不同部位結合。由于抗體具有特異性，因此該檢測方法中，酶標抗體的作用是與待測抗原結合，酶催化檢測底物反應，可通過測定產物量來推測抗原量。

（4）菌體展示技術可能的局限性：不能展示對噬菌體或宿主細胞有毒的蛋白質，噬菌體的蛋白質無法被內質網和高爾基體等加工。