Question

【題目】某種產脂肪酶菌常被用作飼料添加劑，下表是從土壤中初篩該菌的培養基配方，請回答下列問題：

（NH4）2SO4	NaCl	MgSO4·7H2O	K2HPO4	1％橄欖油	蒸餾水	pH
0.1g	0.05g	0.01g	10g	4mL	定容至 100mL	7.0

（1）在上述培養基中，橄欖油能為產脂肪酶菌提供_________。用該培養基進行選擇培養的目的是_____。在選擇培養過程中，使用搖床振蕩效果較好，原因是_____________。

（2）分離產脂肪酶菌時，在上述培養基的基礎上，還應加入瓊脂和溴甲酚紫（堿性條件下呈紫色，在酸性條件下為黃色）。在平板上產脂肪酶菌菌落的周圍會出現黃色圈，原理是_________。篩選時常選擇黃色圈直徑大的菌落，說明_____。

（3）可用稀釋涂布平板法對微生物進行計數，計算得出菌體數目往往比實際的數目低，原因是_________。使用該方法計數時研究人員分別在3個平板上接種稀釋倍數為104的濾液各0.1ml，培養一段時間后， 平板上長出菌落數分別為26、234、258，則每1ml樣品中的活菌數為_____個。還可用濾膜法對微生物進行計數，如測定飲用水中大腸桿菌的數目，將濾膜放在_________培養基上培養，根據培養基上黑色菌落的數目計算出大腸桿菌的數量。

（4）對培養基滅菌常用的方法是_____。此方法用到下圖儀器，圖中甲、乙、丙指示的依次是_____。（填序號）

①安全閥、排氣閥、壓力表

②排氣閥、安全閥、壓力表

③安全閥、排氣閥、溫度表

④排氣閥、安全閥、溫度表

Answer 1

【答案】碳源 增大產脂肪酶菌的濃度 能增加培養液中的溶氧量，并使菌株與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率 脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸，脂肪酸使溴甲酚紫變為黃色 菌體產脂肪酶能力強（脂肪酶活性高或量多） 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 2.46×107 伊紅-美藍 高壓蒸汽滅菌法 ①

【解析】

根據表格分析，該培養基中含有氮源、碳源、水和無機鹽，pH為7（中性），其中碳源是橄欖油中的脂肪，為有機碳源。據圖分析，圖示為高壓蒸汽滅菌鍋，其中甲是安全閥，乙是排氣閥，丙是壓力表。

（1）培養基中橄欖油可以為產脂肪酶菌提供碳源；該培養基上產脂肪酶菌可以大量繁殖，進而增加產脂肪酶菌的濃度；在培養過程中，使用搖床振蕩能增加培養液中的溶氧量，并使菌株與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率。

（2）脂肪酶催化脂肪產生脂肪酸和甘油，脂肪酸使溴甲酚紫變為黃色，因此在平板上產脂肪酶菌菌落的周圍會出現黃色圈；菌體產脂肪酶能力強，產生的脂肪酶越多，則菌落周圍的黃色圈直徑越大。

（3）在利用稀釋涂布平板法對微生物進行計數時，由于菌落會有重疊現象，即當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以計算得出菌體數目往往比實際的數目低。已知3個平板上的菌落數分別是26、234、258，菌液稀釋了104倍，體積為0.1ml，菌落計數時應該取30-300的數據，則每 1ml 樣品中的活菌數=（234+258）÷2×104÷0.1ml =2.46×107個。還可用濾膜法對微生物進行計數，如測定飲用水中大腸桿菌的數目，將濾膜放在伊紅-美藍培養基上培養，根據培養基上黑色菌落的數目計算出大腸桿菌的數量。

（4）微生物培養基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；根據以上分析已知，圖中甲是是安全閥，乙是排氣閥，丙是壓力表，故選①。