Question

【題目】為提高大豆對磷元素的吸收能力，研究人員利用桿菌轉化法將水稻的耐低磷基因OsPTF 轉移到大豆植株中，下圖為重組Ti質粒上T-DNA的序列結構示意圖。下列相關敘述不正確的是

A. 以水稻RNA為模板通過逆轉錄及PCR擴增可獲得大量OsPTF基因

B. RNA聚合酶與啟動子I識別并結合后，啟動抗除草劑基因的轉錄

C. 可通過含除草劑的選擇培養基篩選含有目的的基因大豆愈傷組織

D. 用EcoRI、BamHI雙酶切重組Ti質粒后，經電泳分離至少得到兩條帶

Answer 1

【答案】B

【解析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：

①目的基因的獲取，獲取方法包括：從基因文庫中獲取、PCR擴增技術和人工合成法。

②基因表達載體的構建，是基因工程的核心步驟，基因表達載體的組成包括：啟動子、目的基因、終止子和標記基因。

③將目的基因導入受體細胞，根據不同的對象采用不同的導入方法，對植物細胞可以采用農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；對于動物采用顯微注射技術；對于微生物一般采用Ca2+轉化法。

④目的基因的檢測與鑒定，分子水平上的檢測方法包括：DNA分子雜交法、分子雜交法和抗原-抗體雜交法；也可以進行個體水平上的鑒定，如抗性實驗等。

以水稻RNA為模板通過逆轉錄可以合成cDNA，然后再以cDNA為模板利用PCR擴增可獲得大量OsPTF基因，A正確；識圖分析可知，抗除草劑基因位于啟動子Ⅱ的后面，因此RNA聚合酶與啟動子Ⅱ識別并結合后，啟動抗除草劑基因的轉錄，B錯誤；由于圖中T-DNA的序列中含有目的基因和抗除草劑基因，故可通過含除草劑的選擇培養基篩選含有目的的基因大豆愈傷組織，C正確；用EcoRI、BamHI雙酶切重組Ti質粒后，會得到三種片段：含有耐低磷基因OsPTF的片段、含有除草劑基因的片段和只含啟動子I的片段，因此經電泳分離至少得到兩條帶，即含耐低磷基因OsPTF的片段和含有除草劑基因的片段，D正確。