Question

請分析回答下列有關基因工程問題：

Ι 基因工程是按人們預先設計的藍圖，將目的基因通過一定方法導入到另一種生物的細胞中，使之產生符合人類需要的新的遺傳性狀或創造出新的生物類型的現代技術。

57.基因工程常用的三種工具為限制性內切酶、　　　　　　 、質粒，通常選擇質粒作為“目的基因的運輸載體”是由于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

58.基因工程一般包括四步：獲取目的基因；目的基因與運載體重組；　　　　　　　 ；

　　　　　　　　　 　　。

Ⅱ 在基因工程中通常需要利用PCR技術擴增目的基因，其原理與細胞內DNA復制類似，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR如右圖示，包括三個基本反應步驟：①模板DNA的變性：模板DNA經加 熱至93℃左右一定時間后雙鏈解離；②模板DNA與引 物的退火(復性)：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈結合形成DNA模板--引物結合物；③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一條新的與模板DNA 鏈互補的脫氧核苷酸鏈。重復循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得較多的目的基因。

59.溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈結合形成DNA模板--引物結合物時所遵循的原則是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

60.在PCR技術中，引物的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

61.從理論上推測，第三輪循環產物中含有引物B的DNA片段所占比例為　　　　　　　　 。

62.下圖表示利用PCR技術獲取目的基因X的第一次循環產物。則至少需要在　　　 輪循環產物中才能開始出現獨立且完整的的X基因。如果經過n次循環，則產物中①所示DNA分子數為　　　　　　 。

63.用限制酶EcoRV、MboI單獨或聯合切割同一種質粒，得到DNA片段長度如下圖（1kb即1000個堿基對），請在答題卡的指定位置畫出質粒上EcoRV、MboI的切割位點。

Answer 1

57.DNA連接酶   質粒能進入并停留在受體細胞，甚至能整合到受體細胞DNA上；質粒能進行自我復制；質粒能在受體細胞中表達；質粒上通常含有標記抗性基因    58.重組DNA分子導入受體細胞     篩選含目的基因的受體細胞

59.堿基互補配對    60.能與模板鏈堿基互補配對，引導并作為子鏈合成的起點

61.7/8     62.3     1       63.圖省略（每格1分，共10分）