Question

【題目】牛奶中富含蛋白質，長期飲用有助于增強體質。生牛奶需要經過消毒處理，達到國家檢測標準方可飲用。以下是生牛奶消毒及細菌檢測實驗示意圖，請據圖回答：

（1）培養基中的牛肉膏可以為微生物主要提供______（填兩個），在對培養基進行高壓蒸汽滅菌的過程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當時間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表______時，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，才可以取出滅菌的培養基等物品。

（2）步驟②是______，若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數，可釆用的接種方法是______。

（3）將接種后的培養基和作為對照的______同時放入37 ℃恒溫培養箱中，培養36小時。為避免培養基污染，需將培養皿呈______狀態放置。取出后統計各平板的菌落數，菌落數分別為 67、 65 和63，細菌數大約是______/mL。運用這種方法統計的結果往往較實際值______(填“偏大”或“偏小”)，原因是______。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、維生素等 壓力降為零（指針指向“0”點） 系列稀釋(或梯度稀釋) 稀釋涂布平板法 未接種的培養基 倒置 6.5ⅹ105個 偏小 當兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算

【解析】

識圖分析可知，圖中①過程為巴氏消毒法，對牛奶在80℃進行消毒15min；②過程為對菌液進行梯度稀釋的操作，根據圖中結果可知對菌液稀釋了1000倍，步驟③表示吸取0.1ml的菌液涂布在培養基上，采用稀釋涂布平板法進行計數微生物的數量。

（1）培養基中的蛋白胨可以為微生物的生長提供碳源、氮源和維生素。常采用高壓蒸汽滅菌法對培養基進行滅菌，滅菌的過程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當時間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表壓力降為零時，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，才可以取出滅菌的培養基等物品。

（2）圖中步驟②是系列稀釋(或梯度 稀釋)。若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數，可釆用步驟③所示的稀釋涂布平板法對目的菌進行接種。

（3）將接種后的培養基和作為對照的一個未接種的培養基同時放入37℃恒溫培養箱中培養3小時在倒平板操作中，待平板冷卻疑固后將平板呈倒置狀態放置，可以使培養皿表面的水分更好地揮發，又可以防止皿 蓋上的水珠落入培養皿，對造成培養基污染。按圖示步驟②稀釋1000倍后接種，取岀后各平板的菌落數分別 為67、 65 和63，則細菌數大約是(67+65+63)÷3×10×1000= 6.5×105個/mL。運用稀釋涂布平板法對微生物進行的計數統計的結果往往較實際值偏低，因為對菌落計數時，當兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算，導致計數結果偏低。