Question

【題目】人α1－抗胰蛋白酶（AAT）是一種重要的藥用蛋白，對胰島B細胞有免疫保護作用，AAT可通過轉基因技術在羊乳中獲得。流程如下：

（1）將重組表達載體導入受體細胞中，常選用受精卵作為受體細胞的原因是__________________。

（2）胚胎移植前對代孕母羊進行____________處理，目的是________________________________。胚胎發育到囊胚期，可從_____________分離出胚胎干細胞；為了維持胚胎干細胞不分化的狀態，在體外培養時應_________________________________；若要鑒定胚胎的性別，具體的操作是______________________________________________。

（3）檢測羊乳中是否含有AAT的技術手段是_______________。

Answer 1

【答案】受精卵具有發育的全能性同期發情處理使供體和受體具有相同的生理特征內細胞團放在飼養層細胞上培養(在培養液中添加抑制分化因子)取滋養層細胞進行DNA分子性別鑒定抗原－抗體雜交

【解析】

圖示是轉AAT基因母羊的培育流程，其中涉及基因工程、早期胚胎培養、胚胎干細胞的獲取和胚胎移植等技術的應用。其中基因工程的受體細胞之所以選擇受精卵，主要是因為動物體細胞的全能性受到限制，而受精卵具有全能性最高，且細胞大、易操作等優點。在早期胚胎培養過程中若要獲得胚胎干細胞，可以從培養的囊胚中內細胞團獲取；若要進行胚胎的性別鑒定，常常取滋養層細胞進行DNA鑒定；在胚胎移植中，需要對接受胚胎的受體母羊進行同期發情處理，使其供體和受體具有相同的生理特征，而易于接受胚胎。最后在檢測AAT是否存在時，通常采用抗原-抗體雜交技術。

（1）為培育轉基因動物，常選用受精卵作為目的基因的受體細胞，是因為受精卵大，易于操作且具有發育的全能性。

（2）為了使供體和受體具有相同的生理特征，胚胎移植前對代孕母羊要進行同期發情處理。胚胎發育到囊胚期，可從囊胚內的內細胞團分離出胚胎干細胞；為了維持胚胎干細胞不分化的狀態，在體外培養時應放在飼養層細胞上培養或者在培養液中添加抑制分化因子；若要鑒定胚胎的性別，應取滋養層細胞進行DNA分子性別鑒定，因為滋養層細胞與內細胞團的細胞都是同一個受精卵分裂分化來的，遺傳物質一般相同。

（3）檢測羊乳中是否含有AAT的原理是把AAT當作抗原，在分泌的羊乳中加入特定的抗體，觀察是否會出現抗原-抗體的結合反應。若出現，說明羊乳中含有AAT，反之，則沒有；這種技術手段稱為抗原-抗體雜交技術。