Question

【題目】有機農藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環境，研究發現，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，分離能降解苯磺隆菌株的實驗過程如下圖所示。請回答問題：

(1)微生物生長繁殖所需的主要營養物質有碳源、水、________、________四類，該實驗所用的選擇培養基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是_________________________________。

(2)純化菌株時，通常使用的劃線工具是________。在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是____________________________________________________。

(3)若要檢測土樣中的細菌含量，應采用__________法。在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板培養基先行培養了一段時間，這樣做的目的是____________________________________。

然后，將1 mL土壤溶液稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1 mL稀釋液，經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為39、38和37。據此可得出每升土壤溶液中的活菌數為________個。

Answer 1

【答案】（1）氮源 無機鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖

（2）接種環 將聚集的菌體逐步減少以便獲得單個菌落

（3）稀釋涂布平板 檢測培養基平板滅菌是否合格 3.8×107

【解析】試題分析：微生物的營養物質主要有碳源、氮源、水和無機鹽等．篩選目的微生物必須使用選擇培養基．從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株常用的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解：（1）微生物生長所需要的主要營養物質包括：碳源、氮源、水和無機鹽．使用選擇培養基是因為選擇培養基只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖，同時又能抑制或阻止其他微生物的生長的培養基．（2）平板劃線法接種時常使用接種環劃線．在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線．這樣做的目的是將聚集的菌體逐步減少以便獲得單個菌落．

（3）興奮題表平板法常常用來進行微生物的分離和計數．為檢驗培養基平板滅菌是否合格，常常需要在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板培養基先行培養了一段時間，觀察有無菌落形成，若沒有菌落形成則表明培養基滅菌合格，否則則不合格．根據題意，每升土壤溶液中的活菌數為：（39+38+37）÷3×100÷0.1×1000=3.8×107個．

故答案為：

（1）氮源 無機鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖

（2）接種環 將聚集的菌體逐步減少以便獲得單個菌落

（3）稀釋涂布平板 檢測培養基平板滅菌是否合格 3.8×107