Question

【題目】【加試題】回答下列（一）、（二）小題：

（一）炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病。對炭疽病疑似患者，可通過甲圖所示鑒定炭疽桿菌的實驗進行確診，其中實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌。

（1）若要從炭疽病疑似患者體內分離出炭疽桿菌，可將患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養基表面，用無菌玻璃刮刀涂勻，該接種方法稱為____________。乙圖所示的四種菌落分布圖中，該接種方法不能得到的是_________________。

（2）制備甲圖中的液體培養基時需采取______________法滅菌。接種可疑菌后，需將三角瓶置于35℃下的搖床上___________培養24小時，可疑菌會大量繁殖，液體培養基變渾濁。

（3）甲圖中，對照組與實驗組試管同時培養6小時后，若實驗組液體培養基的渾濁度比對照組________（高/低），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此判斷的依據是______________。

（二）印度沙漠貓是一種珍稀貓科動物，通過胚胎工程技術，可以讓家貓代孕而繁育，主要步驟如下圖所示。

（1）步驟甲、乙分別是指 ___________、_______________。

（2）卵巢經超數排卵處理后，要使用超聲監視器確定_______________的位置，插入穿刺針吸取其液體，取出_______________，在體外進行人工培養得到成熟的卵細胞。

（3）若在早期細胞培養過程中，發現某個細胞出現變異性狀，科研人員提取這個細胞進行單獨培養，此種培養方法稱為___________。培養過程中,下列哪種細胞比較難以克隆？_____________

A.有限細胞系

B.無限細胞系

C.轉化細胞系

D.腫瘤細胞系

Answer 1

【答案】 涂布分離法 D 高壓蒸汽滅菌 震蕩 低 噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數量下降 體外受精或受精作用 胚胎移植 卵泡 卵母細胞（或次級卵母細胞） 克隆培養法或細胞克隆 A

【解析】分析題圖：(一）微生物實驗室分離中配制培養基的操作步驟：計算→稱量→溶解→調pH→滅菌步驟；(二）步驟甲為受精作用，步驟乙為胚胎移植，其中誘導超數排卵用的是促性腺激素，受精過程使用的培養液是獲能溶液或專用受精溶液，早期胚胎培養的培養液成分，除了一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。

(一）

(1)稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分布涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養．由圖中四種菌落分布情況可知，A、B和C是采用稀釋涂布平板法得到的，而D是采用平板劃線法得到的。

(2) 制備圖1中的液體培養基時應該用高壓蒸汽滅菌 法進行滅菌，以殺死微生物及芽孢．接種可疑菌后，35℃培養24小時，細菌大量繁殖，液體培養基變渾濁。

(3) 對照組試管中應加入等量生理鹽水，與實驗組同時培養6小時后，若實驗組液體培養基的渾濁度比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此實驗依據的原理是實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細菌死亡，溶液變澄清。

(二）

(1) 步驟甲為受精作用，步驟乙為胚胎移植；

(2) 卵巢經超數排卵處理后，要使用超聲監視器確定卵泡的位置，插入穿刺針吸取其液體，取出卵母細胞（或次級卵母細胞）。

(3) 提取這個細胞進行單獨培養，此種培養方法稱為克隆培養法或細胞克隆。有限細胞系由于增殖能力有限（10-50代），轉化細胞具有較強的適應能力，容易克隆。