Question

【題目】受損傷的馬鈴薯細胞內酚氧化酶（PPO）和底物（酚類物質）直接接觸，引起馬鈴薯的褐變，為探究溫度對PPO活性的影響，實驗小組進行如下實驗：

（1）PPO粗提液的提取

低溫下將新鮮馬鈴薯用蒸餾水洗凈、去皮，取20g樣品放入含50mL磷酸緩沖液（PH值為5．5）的研缽中，同時加入少量石英砂，研磨、離心、上清液即為PPO的粗提液，加緩沖液研磨的目的是

（2）不同溫度下PPO活性的測定

步驟順序	試管1	試管2	試管3	試管4	試管5	試管6	試管7	試管8
PPO粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
酚類底物		2mL		2mL		2mL		2mL
反應	混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩
溫度預處理	（5min）0℃		15℃		30℃		45℃
保溫時間	5min		5min		5min		5min
記錄結果	+		++++		++++		++

（注：反應底物充足；實驗結果中“+”越多褐色越深）

①實驗步驟順序有不妥之處，請改正 。

②實驗結果表明：15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，從酶的特性分析其原因是 。

③為進一步探究PPO最適溫度，應在 范圍內設置溫度梯度。

（3）I．在溫度30℃的條件下，取等量提取液分別加到四支盛有等量過氧化氫溶液、pH分別為3、5、7、9的試管中，結果發現每一支試管都產生氣體。請回答：

①該實驗的課題是： 。

②各實驗組均在30℃下進行的原因是：a ；b 。

Ⅱ．將加入4支試管中的馬鈴薯提取液的量減半，重復實驗I。分別測定實驗I、Ⅱ中過氧化氫在相同時間內的含量變化，繪制成如圖所示曲線，請回答：曲線A是實驗 （選填I或Ⅱ）的結果。

Answer 1

【答案】（14分，除特殊注明外，每空2分）

（1）保持PPO的活性（防止PPO失活）

（2）①“反應”步驟改在“溫度預處理”之后

②在酶的最適溫度前后，可以有相同的催化效率（合理給分）

③15℃30℃

（3）Ⅰ．①探究不同PH對過氧化氫酶活性的影響

②30℃是過氧化氫酶作用的適宜溫度（1分）排除溫度變化（無關變量）對實驗結果的影響 （1分）

Ⅱ．Ⅱ

【解析】（1）過酸、過堿都會使酶的空間結構被破壞，使酶失活，研磨時加緩沖液研磨的目的是防止酚氧化酶（PPO）失活。

（2）①本實驗應該將酶和底物先放在不同的溫度條件下一段時間，再將相同溫度下的酶和底物混合，故“反應”步驟改在“溫度預處理”之后。

②15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，是因為在酶的最適溫度前后，可以有不同的溫度條件相同的催化效率。

③15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，故該酶的最適溫度位于15℃-30℃之間，故在15℃-30℃范圍內設置溫度梯度，可以進一步探究酶的最適溫度。

（3）Ⅰ、①該題自變量是不同pH值，因變量為酶活性，所以實驗目的是探究不同pH對過氧化氫酶活性的影響。

②30℃是過氧化氫酶的適宜溫度，恒溫是排除溫度變化（無關變量）對實驗結果的影響。

Ⅱ、圖中的A曲線和B曲線相比，A曲線在相同時間情況下，底物剩余量較B多，說明酶量更少，是實驗Ⅱ結果的曲線。