Question

【題目】剛果紅能夠與纖維素形成紅色復合物，可用其鑒定纖維素分解菌。某研究小組將濾紙埋在土壤中，30天后從濾紙上取部分土壤樣品加入生理鹽水中溶解，得到了富有纖維素分解菌的菌原液，并進行如下實驗。回答下列問題：

（1）稀釋菌原液：為確定合適的稀釋倍數，小組成員取1 mL菌原液進行如下圖所示的操作，在統計菌落時，發現平板上的平均菌落數為40個，則每毫升菌原液中的細菌數大約為____________個。

（2）培養基的準備：在對培養基進行高壓蒸汽滅菌的過程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當時間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的指針______時，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，才可以取出滅菌的培養基等物品。待培養基冷卻至____（填溫度）左右時倒平板，將平板倒置的目的是____________。在培養基凝固之前加入滅菌的剛果紅，從功能上來看，該培養基屬于__________（“選擇”或“鑒別”）培養基，培養基中碳源主要是____________。　

（3）接種與觀察：在無菌條件下，用移液槍取0.1 mL稀釋后的菌懸液進行圖1中_____所示的操作，室溫放置2～3分鐘后倒置于恒溫箱中培養，使菌液完全被培養基吸收。培養過程中定期觀察菌落特征和透明圈的大小，圖2中D/d的值越_______，表示該菌對纖維素分解能力越強。

Answer 1

【答案】4106 降為零 50℃ 防止冷凝水滴入培養基，造成污染 鑒別 纖維素 甲 大

【解析】

由題文描述和圖示分析可知：該題考查學生對微生物的實驗室培養、分解纖維素的微生物的分離等相關知識的識記和理解能力，以及識圖分析能力。

(1)依題意和圖示分析可知：取1mL菌原液稀釋104倍，之后取0.1mL稀釋后的菌液進行接種并平板培養。在統計菌落時，發現平板上的平均菌落數為40個，則每毫升菌原液中的細菌數大約為40÷0.1×104＝4×106個。

(2) 在對培養基進行高壓蒸汽滅菌的過程中，到滅菌時間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的指針降為零時，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，取出滅菌的培養基等物品。待培養基冷卻至50℃左右時倒平板。為了防止冷凝水滴入培養基，造成污染，待平板冷卻凝固后需將平板倒過來放置。由題意“剛果紅能夠與纖維素形成紅色復合物，可用其鑒定纖維素分解菌”可知：在培養基凝固之前加入滅菌的剛果紅，從功能上來看，該培養基屬于鑒別培養基。欲鑒定纖維素分解菌，其培養基中應以纖維素為唯一碳源。

(3)在無菌條件下，用移液槍取0.1 mL稀釋后的菌懸液，應對其進行圖1中甲所示的涂布平板操作。剛果紅可與纖維素形成紅色復合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發生顏色反應；當纖維素被纖維素酶水解后，剛果紅-纖維素復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，透明圈越大，說明纖維素分解菌降解纖維素的能力最強。圖2中的D為透明圈的直徑，d為菌落的直徑，可見，D/d的值越大，表示該菌對纖維素分解能力越強。